植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系說明書價格優(yōu)惠

快速的從植物（如：水稻、小麥、煙草、玉米、大豆、油菜、棉花等）的種子樣本中釋放出基因組 DNA，直接用于 PCR 反應(yīng)，并采用UNG防PCR產(chǎn)物污染體系，因此特別適合大規(guī)模基因檢測。? 無需進行費時而昂貴的 DNA 純化。

樣品需求量小，只需取單粒種子即可。

 無需研磨、破碎等特殊處理，操作簡便。

防污染 PCR 體系 2× Seed PCR EasyTM Mix(UNG)，有效消除由 PCR 產(chǎn)物所引起的污染，保證擴增的

   特異性和準確性。

植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系上海滬崢供應(yīng)

產(chǎn)品介紹

本產(chǎn)品采用獨特的裂解反應(yīng)體系，能夠快速的從植物（如：水稻、小麥、煙草、玉米、大豆、油菜、棉花等）的種子樣本中釋放出基因組 DNA，用于 PCR 反應(yīng)，因此特別適合大規(guī)?；驒z測。為了滿足不同檢測試驗的需要，本試劑盒可以使用多種類型的樣本（如完整種子、微量組織切塊或多顆種子的磨碎樣本）進行實驗。其中，對于還需要進行萌發(fā)的種子樣本，可以選擇切取種胚以外的微量組織切塊(1-5mg)進行實驗；對于需要在大量樣本中進行抽樣檢測的實驗，可以選擇將多個樣本混合并磨碎成直徑0.5mm 左右的顆粒后再進行實驗（*可以檢測出

0.1%的目的樣本）。

裂解反應(yīng)體系釋放基因組 DNA 過程可以在 5-10min 內(nèi)完成，不需要其他去蛋白、RNA或者次生代謝產(chǎn)物的過程，即可將釋放出的微量 DNA 作為模板進行 PCR 反應(yīng)。

2× Seed PCR EasyTM  Mix(UNG)在 2× Seed PCR EasyTM Mix 的基礎(chǔ)上用 dUTP 替代了 dTTP，并同時加入能夠降解含有 dUTP 模板的

UNG 酶(Uracil-N-glycosylase)。在PCR 反應(yīng)前，利用 UNG 酶降解含有尿嘧啶的 PCR 產(chǎn)物，UNG 酶對不含有尿嘧啶的模板不會造成任何影響，從而保證擴增的特異性和準確性，防止了大規(guī)?；驒z測時可能出現(xiàn)的 PCR 產(chǎn)物污染問題。

D-Taq DNA polymerase 是 Foregene 為直接PCR反應(yīng)專門研制出的DNA polymerase。D-Taq DNA polymerase 對多種 PCR 反應(yīng)抑制劑具有極強的的耐受性、在各種復(fù)雜反應(yīng)體系中均能高效擴增痕量的 DNA，擴增速度可達 2Kb/min，特別適合進行直接 PCR反應(yīng)。

植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系上海滬崢供應(yīng)

試劑盒內(nèi)容

Part I (Store at R.T. or 4°C)

 Buffer SP1：提供植物種子裂解反應(yīng)所需的環(huán)境。

 Buffer SP2：中和裂解產(chǎn)物，使其不影響后續(xù) PCR 反應(yīng)。

6× DNA Loading Buffer：該 Loading Buffer 中不含有 SDS。建議在進行瓊脂糖凝膠電泳時，配搭使用試劑盒附贈的

   6× DNA Loading Buffer，以便取得好的電泳結(jié)果。切勿使用含有 SDS 的 Loading Buffer，否則在電泳時會在泳時會在泳道中有一大團拖尾

   亮光，影響實驗結(jié)果。

Part II (Store at -20°C）

 2× Seed PCR EasyTM (UNG)：在 2× Seed PCR EasyTM Mix 的基礎(chǔ)上用 dUTP替代了 dTTP，并同時加入能夠降解含有 dUTP 模板的

   UNG 酶，從而能夠有效防止 PCR 擴增產(chǎn)物污染。

PCR實驗方法步驟方法

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

植物種子直接PCR試劑盒—防PCR產(chǎn)物污染體系說明書價格優(yōu)惠試劑盒應(yīng)用

適用范圍：多種植物種子。 裂解混合液：僅用作 PCR 模板。

 試劑盒可用于以下用途：轉(zhuǎn)基因種子鑒定、植物基因分型等。