【產(chǎn)品名稱】

通用名稱：兔黏液瘤病毒（RMV）熒光PCR檢測(cè)試劑盒

【包裝規(guī)格】48T/盒

Name ：Rabbit mucoma virus (RMV) nucleic acid detection kit (PCR- fluorescence probe method)

兔黏液瘤病毒（RMV）熒光PCR檢測(cè)試劑盒【預(yù)期用途】

本試劑盒適用于檢測(cè)動(dòng)物腺、肝、脾、肺組織及人痰、血液等標(biāo)本中分離出的指標(biāo)，用于指標(biāo)的定量檢測(cè)

兔黏液瘤病毒（RMV）熒光PCR檢測(cè)試劑盒【使用方法】

試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）

根據(jù)待檢測(cè)樣本總數(shù)，設(shè)所需要的 PCR 反應(yīng)管管數(shù)為 N(N=樣本數(shù)+1 管陰性對(duì)照+1 管陽(yáng)性對(duì)照；樣品每滿 7 份，多配制 1 份)，每測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表：

試劑	反應(yīng)液	酶液
用量（樣本數(shù)為 N）	20μL	1μL

將混合好的測(cè)試反應(yīng)液分裝到 PCR 反應(yīng)管中，21uL/管。

加樣（樣本處理區(qū)）

將步驟 1 提取的 DNA、陽(yáng)性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品各取 4μL，分別加入相應(yīng)的反應(yīng)管中，蓋好管蓋，混勻，短暫離心。

PCR 擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）

將待檢測(cè)反應(yīng)管置于熒光定量 PCR 儀反應(yīng)槽內(nèi)；

設(shè)置好通道、樣品信息，反應(yīng)體系設(shè)置為 25μL；

熒光通道選擇： 檢測(cè)通道（Reporter Dye）FAM， 淬滅通道（Quencher Dye）

NONE，請(qǐng)勿選擇 ROX 參比熒光。

推薦循環(huán)參數(shù)設(shè)置：

步驟	循環(huán)數(shù)	溫度	時(shí)間	收集熒光信號(hào)
1	1 cycle	95℃	10min	否
2	40 cycles	94℃	15sec	否
		55℃	30sec	是

結(jié)果分析判定

結(jié)果分析條件設(shè)定

設(shè)置 Baseline 和 Threshold：一般直接按機(jī)器自動(dòng)分析的結(jié)果分析，當(dāng)曲線出現(xiàn)整體傾斜時(shí)，根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值(一般可在 3~15 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))、stop 值(一般可在 5~20 范圍內(nèi)調(diào)節(jié))，以及 Threshold 的 Value 值(上下拖動(dòng)閾值線至高于陰性對(duì)照)，重新分析結(jié)果。

結(jié)果判斷

陽(yáng)性：檢測(cè)通道 Ct 值≤35.0，且曲線有明顯的指數(shù)增長(zhǎng)曲線。

可疑：檢測(cè)通道 Ct 值>35.0，且出現(xiàn)明顯擴(kuò)增曲線的樣本建議重復(fù)試驗(yàn)，重復(fù)試驗(yàn)結(jié)果出現(xiàn) Ct 值≤35.0 和明顯擴(kuò)增曲線者為陽(yáng)性，否則為陰性。

陰性：樣本檢測(cè)結(jié)果無(wú) Ct 值且無(wú)明顯的擴(kuò)增曲線。

檢測(cè)方法的局限性

樣本檢測(cè)結(jié)果不樣本收集、處理、運(yùn)送以及保存質(zhì)量有關(guān)；

樣本提取過(guò)程中沒(méi)有控制好交叉污染，會(huì)出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果；

陽(yáng)性對(duì)照、擴(kuò)增產(chǎn)物泄漏，會(huì)導(dǎo)致假陽(yáng)性結(jié)果；

病原體在流行過(guò)程中基因突變、重組，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

不同的提取方法存在提取效率差異，會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果；

試劑運(yùn)輸，保存不當(dāng)或試劑配制不準(zhǔn)確引起的試劑檢測(cè)效能下降，出現(xiàn)假陰性或定量檢測(cè)不準(zhǔn)確的結(jié)果。

質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)

陰性質(zhì)控品：無(wú)明顯擴(kuò)增曲線或無(wú) Ct 值顯示；

陽(yáng)性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯指數(shù)生長(zhǎng)期，且 Ct 值≤32； 以上條件應(yīng)同時(shí)滿足，否則實(shí)驗(yàn)視為無(wú)效。

【參考文獻(xiàn)】

國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局.SN/T 1280-2003 國(guó)境口岸鼠疫檢驗(yàn)規(guī)程[S].北京:科學(xué)出版社, 2003.

張志凱, 海榮, 蔡虹, 等. 鼠疫耶爾森菌的多重 PCR 檢測(cè)方法[J]. 中國(guó)媒介生物學(xué)及控制雜志, 2007.

吉林省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督局. DB22/T 2081-2014 鼠疫耶爾森菌核酸的測(cè)定-熒光PCR 方法[S].

兔黏液瘤病毒（RMV）熒光PCR檢測(cè)試劑盒【儲(chǔ)存條件及有效期】

-20℃±5℃，避光保存、運(yùn)輸、反復(fù)凍融次數(shù)不超過(guò) 5 次，有效期 12 個(gè)月。

【適用儀器】

ABI 、安捷倫 MX3000P/3005P、LightCycler、Bio-Rad、eppendorf 等系列熒光定量 PCR 檢測(cè)儀。

【標(biāo)本采集】

患病動(dòng)物：腺、肝、脾、肺組織、糞便、血液人：痰；尿液、血液

【保存和運(yùn)輸】

上述標(biāo)本短期內(nèi)可保存于-20℃，長(zhǎng)期保存可置-70℃，但不能超過(guò) 6 個(gè)月，標(biāo)本運(yùn)送應(yīng)采用 2~8℃冰袋運(yùn)輸，嚴(yán)禁反復(fù)凍融。

【產(chǎn)品圖片】

【生產(chǎn)企業(yè)】

企業(yè)名稱：上海烜雅生物科技有限公司

生產(chǎn)地址：金海公路3265號(hào)14幢11546室

上海烜雅生物科技有限公司生產(chǎn)的兔黏液瘤病毒（RMV）熒光PCR檢測(cè)試劑盒供應(yīng)質(zhì)量高，價(jià)格低，售后有保證。為您的實(shí)驗(yàn)保駕護(hù)航。

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本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷。

兔黏液瘤病毒（RMV）熒光PCR檢測(cè)試劑盒 產(chǎn)品：

豬病    XY-SD-R-1061    高致病性豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV-M)核-酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR熒光探針?lè)?

豬病    XY-SD-R-1062 豬藍(lán)耳病病毒經(jīng)典型(PRRSV-C)核-酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR熒光探針?lè)?

豬病    XY-SD-R-1063    口蹄疫病毒O型(FMDV-O)核-酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR熒光探針?lè)?

豬病    XY-SD-R-1064    豬瘟病毒野毒株(CSFV-W)核-酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR熒光探針?lè)?

豬病    XY-SD-R-1065    豬水皰病毒(SVDV)核-酸檢測(cè)試劑盒(RT-PCR熒光探針?lè)?

豬病    XY-SD-R-1066    豬病熒光PCR試劑盒

其他動(dòng)物病    XY-RD-D-1067    牛結(jié)核分枝桿菌(MB)核-酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?

其他動(dòng)物病    XY-RD-D-1068    牛副結(jié)核分枝桿菌(MPB)核-酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?

其他動(dòng)物病    XY-RD-D-1069    布氏桿菌(BS)核-酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?

其他動(dòng)物病    XY-RD-D-1070    山羊痘病毒(GTPV)核-酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?

人BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒

人B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)ELISA試劑盒

人腫瘤特異生長(zhǎng)因子/腫瘤相關(guān)因子(TGSF)ELISA試劑盒

人色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA試劑盒

人克拉拉細(xì)胞蛋白(CC16)   ELISA試劑盒

人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)ELISA試劑盒

人黑色素細(xì)胞抗體(MC   Ab)ELISA試劑盒

人轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TFR/CD71)ELISA試劑盒

人P53(P53)ELISA試劑盒

人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA試劑盒

人細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA

人細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA試劑盒

人內(nèi)皮抑素(ES)ELISA試劑盒

人鐵蛋白(FE)ELISA試劑盒

人微量轉(zhuǎn)鐵蛋白(MTF)ELISA試劑盒

人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)ELISA試劑盒

人髓鞘堿性蛋白抗體(MBP)ELISA試劑盒

人組織多肽抗原(TPA)ELISA試劑盒

人肺癌標(biāo)志物ELISA試劑盒

人胃癌標(biāo)志物ELISA試劑盒

人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2(SCCAg-2)ELISA試劑盒

人*癌標(biāo)志物CA242ELISA試劑盒

人胃腸癌標(biāo)志物CA199ELISA試劑盒