
中華枝睪吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒
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特點:
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準確快速
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳
4. 提供陽性對照,便于分析試驗結果
產(chǎn)品名稱 | 中華枝睪吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 |
英文名稱 | Clonorchis sinensis |
規(guī)格 | 50次 |
使用方法:
一、樣品 RNA 的制備
1、用自選方法抽提病毒樣品 RNA。注意:可以選用本公司生產(chǎn)的一管式病毒 RNAout
2、或柱式病毒 RNAout。
二:RT(逆轉(zhuǎn)錄)反應合成 cDNA
1. 按下表配制 RT 反應體系(20 μL 體系)
2. 70℃保溫 5 分鐘變性模板后立即冰浴。
3. 嚴格按順序加入 6μL RT Buffer(含 dNTP)和 2μL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),
反應終體積為 20μL。
4. 42℃保溫 60 分鐘。此步為 RT 反應。
5. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,然后放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以直接作為 PCR 模板使用,丌需要純化。
自備物品:
15毫升錐形離心管:用于制備樣品的容器
比色皿:用于比色的容器
96孔酶標板:用于比色的容器
分光光度儀:用于比色分析
酶標儀:用于微量樣品比色分析
儲存條件
14℃或-20℃
注意事項:
建議加樣順序是陰性質(zhì)控品、待檢樣本、陽性質(zhì)控品。4. PCR擴增(擴增區(qū))
1) 儀器設置(以ABI Prism 7500為例)
將PCR反應管放入PCR儀內(nèi),按照對應順序設置陰性質(zhì)控品(NTC)、陽性質(zhì)控品(Standard)及待檢樣本(Unknown)。Reporter Dye為FAM,Quencher Dye為None,參比染料(Passive Reference)為 None。
2 ) 擴增程序
40Cycles
50℃ 10min
95℃ 3min
95℃ 10sec
60℃ 1min
60℃采集熒光信號,反應體系為25 μl。
特點優(yōu)勢:
1.特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析,經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證,重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現(xiàn)對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1:序列資源豐富,除GenBank公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優(yōu)勢2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。
大豆Glycinemax(L.)merr Soyasaponin Ba 大豆皂苷Ba 114590-20-4 C48H78O19 ≥98%
原薯蕷皂苷ProtodioscinHPLC≥98%,20mg/支
遠志皂苷A Onjisaponin A 20mg HPLC≥98% 用于含量測定
對照品新霉胺130411-200307檢查
Cyanidin chloride錄化度:>98%
人參Panax ginseng C. A. Mey. Panaxaiol 人參三醇 32791-84-7 C30H52O4 ≥98%
γ-安基丁醋Gcmmccminobyricccid100mg/支
牙香樹Aquilaria sinensis Velin 氈毛美洲茶速 25739-41-7 C17H14O6 p-聚傘花烴(5911
中藥對照藥材鳳尾草121312-200301TLC法鑒別
Chelidonine白屈菜堿度:95%
異補骨脂二氫黃酮 31524-62-6 檢測用對照品 無
牙香樹Aquilaria sinensis 2-O-alpha-L-鼠李糖甙鳶尾酚同 943989-68-2 C19H20O9 ≥98.5% CHELIDONINE, (+-(P0 406-025
對照品咪喹莫 特100632-200401含量測定
Dexametxasone地塞米松標準品1950-2-2125mg地塞米松標準品
粉葉小檗Berberis pruinosa 3,4-Dixy7noxycinnamamide 3,4-二羥基肉桂酰胺 1202-41-1 C9H9NO3 ≥95%
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公司即用型PCR試劑盒:
中華枝睪吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應,具有廣泛的用途。
1. 方便,用戶只需準備模板和引物既可以進行PCR 實驗。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實驗誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應液可直接上樣電泳,進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應的靈敏度高,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進行PCR反應(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應結束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結果。