檢測方法：

1.Ⅰ法：

在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加完全同步。

定量PCR擴增熒光曲線圖

PCR產(chǎn)物熔解曲線圖

2.TaqMan探針法：

探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成完全同步。

儲存條件：

14℃或－20℃樣品收集、處理及保存方法

1. 血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細胞刺激，收集血液后，3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。

2. 血漿：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。

3. 細胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。

5. 保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復(fù)凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

探針法：

aqMan 探針是一種寡核苷酸探針，它的熒光與目的序列的擴增相關(guān)。它與目標序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團連接在探針的5’ 末端，而淬滅劑則在3’ 末端。當完整的探針與目標序列配對時，熒光基團發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進行延伸反應(yīng)時，聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進行酶切，使得熒光基團與淬滅劑分離。隨著擴增循環(huán)數(shù)的增加，釋放出來的熒光基團不斷積累。因此熒光強度與擴增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準確性。

參數(shù)規(guī)格：

產(chǎn)品名稱：博湖轉(zhuǎn)基因品系油菜45A37探針法qPCR試劑盒50次

英文名稱：Probe qPCR kit for transgenic rapeseed 45a37

貨號：BHP6630

產(chǎn)品規(guī)格：50次

產(chǎn)品運輸：低溫運輸

產(chǎn)品保存：-20℃保存

產(chǎn)品有效期：一年

產(chǎn)品特點：

產(chǎn)品僅用于科研

本產(chǎn)品就是根據(jù)保守區(qū)設(shè)計引物而開發(fā)的高靈敏PCR檢測試劑盒 。

操作流程：

1. 產(chǎn)品僅用于科研整個檢測過程應(yīng)嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴增區(qū)進行操作，各區(qū)實驗服、儀器 、耗材應(yīng)獨立使用，不能混用；實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭；樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜，樣本處理在生物安全柜中進行操作；三個區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。

2. 為避免RNA降解，樣本處理過程應(yīng)在0-4℃條件下操作，且完成實驗后立即上機檢測；樣本處理過程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過無核酶處理。

3. 每次實驗應(yīng)該設(shè)置陰、陽性對照。

4. 試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融化混勻，并應(yīng)瞬時離心。

5. 試劑盒內(nèi)所配陰性和陽性對照在一次使用前應(yīng)全部轉(zhuǎn)移至標本準備區(qū)，并單獨存放。

6. 為防止熒光干擾，應(yīng)避免裸手直接接觸PCR反應(yīng)管，并應(yīng)避免在PCR反應(yīng)管上進行任何標記。

7. 儀器 擴增相關(guān)參數(shù)應(yīng)按照本說明書相關(guān)要求進行設(shè)置；不同批號試劑不能混用。

8. ABI系列熒光定量PCR儀參數(shù)設(shè)置中不選ROX校正，淬滅基因選擇None。

9. 實驗過程中產(chǎn)品的廢棄物應(yīng)該進行無害化處理后方可丟棄。

成纖維細胞生長因子15(FGF15)  規(guī)格：1g    英文：HNMT

成纖維細胞生長因子17(FGF17)  規(guī)格：1g    英文：HRH4

成纖維細胞生長因子18(FGF18)  規(guī)格：20mg    英文：HDC

成纖維細胞生長因子18(FGF18)  規(guī)格：5.5ug/支    英文：HRG

成纖維細胞生長因子18(FGF18)  規(guī)格：100mg    英文：HRC

成纖維細胞生長因子19(FGF19)  規(guī)格：0.2ml    英文：PHB2

成纖維細胞生長因子19(FGF19)  規(guī)格：200mg    英文：PHB

成纖維細胞生長因子21(FGF21)  規(guī)格：30mg    英文：PCX

成纖維細胞生長因子21(FGF21)  規(guī)格：2g    英文：MPP6

成纖維細胞生長因子21(FGF21)  規(guī)格：2.5g    英文：MPP5

成纖維細胞生長因子23(FGF23)  規(guī)格：30mg    英文：MPP2

成纖維細胞生長因子23(FGF23)  規(guī)格：100mg    英文：ATG16L1

成纖維細胞生長因子23(FGF23)  規(guī)格：100mg    英文：AMBRA1

成纖維細胞生長因子3(FGF3)  規(guī)格：100mg    英文：AIRE

成纖維細胞生長因子3(FGF3)  規(guī)格：100mg/支    英文：TPBG

Isobavachromene鹽酸沙氟沙星;鹽酸沙拉沙星(標準品)  分子式：C37H30O16  性狀：Brown powder  純度：97.0%

Dorsmanin A甲硫二苯馬尼/二苯馬尼甲硫酸鹽  分子式：C30H26O12  性狀：Brown powder  純度：97.5%

Isodorsmanin A甲硫二苯馬尼(標準品)  分子式：C30H20O10  性狀：Yellow powder  純度：98.0%

Phlorizin吡嗪-2-羧酸，吡嗪單羧酸  分子式：C45H38O18  性狀：Brown powder  純度：97.5%

Trilobatin達格列嗪;達格列凈  分子式：C31H20O10  性狀：Yellow powder  純度：98.0%

Methyllinderone甘草查而酮 A(標準品)  分子式：C30H22O10    純度：98.0%

Linderone三氯卡班  分子式：C30H20O10  性狀：Yellow powder  純度：97.5%

Pashanone氯法齊明（標準品）  分子式：C44H34O20  性狀：Brown powder  純度：97.0%

Methyllucidone頭孢呋辛酯  分子式：C25H20O10  性狀：Yellow powder  純度：98.0%
博湖轉(zhuǎn)基因品系油菜45A37探針法qPCR試劑盒50次環(huán)己胺 Cyclohexylamine 規(guī)格：100mg

環(huán)吡酮胺 Ciclopirox olamine 規(guī)格：50mg

果糖 Fructose 規(guī)格：100mg

富馬酸酮替芬 Ketotifen fumarate 規(guī)格：50mg

富馬酸氯馬斯汀 Fumaric acid chloride Mastin 規(guī)格：50mg

醋酸甲萘氫醌 Menadiol diacetate 規(guī)格：50mg

醋酸去氧皮質(zhì)酮 Desoxycorticosterone acetate 規(guī)格：30mg

半乳糖 Galactose 規(guī)格：300mg

貝諾酯 Benorilate 規(guī)格：100mg

異維A酸 Different dimension A acid 規(guī)格：100mg

鹽酸維拉帕米 Vera Pammy hydrochloride 規(guī)格：50mg

鹽酸羅通定 Luo Tongding hydrochloride 規(guī)格：100mg