產(chǎn)品及特點: 

因此快速靈敏檢測耶氏肺孢子蟲具有重要意義。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒，耶氏肺孢子蟲LAMP試劑盒50次它具有下列特點：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強，只擴增耶氏肺孢子蟲，與其他植物沒有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

操作步驟：

1：樣品準(zhǔn)備：取1毫升細胞培養(yǎng)上清（貼壁和懸浮細胞都可以,*已培養(yǎng)48小時以上），在16000g離心5分鐘，小心棄去上清，避免丟失沉淀（沉淀量有可能很少，目視看不到）。將沉淀用無菌PBS重懸，在16000g離心5分鐘，同樣小心棄去上清，如此反復(fù)用無菌PBS洗三次。*將獲得的沉淀用100微升超純水重懸，置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個月。

2：PCR反應(yīng)的準(zhǔn)備：

待各組份融化后先瞬時離心，然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系，每次實驗需加一個陰性和一個陽性對照，測試反應(yīng)管可以有多個。配制過程中應(yīng)注意無菌，戴口罩，并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染，推薦在有風(fēng)壓的設(shè)備如超凈臺或生物安全柜中進行操作。建議配制完畢后瞬時離心以使液體沉至管底。

檢測特異性與靈敏度:

高性能的UNICONTM Taq熱啟動酶及組分優(yōu)化的反應(yīng)體系保證高度的特異性擴增，提升了擴增效率，使得UNICONTM qPCR Master Mix具有極高的檢測靈敏度。以人293T細胞cDNA為模板，在相同條件下擴增低拷貝hbcl6基因，與同類產(chǎn)品相比，UNICONTM qPCR Master Mix具有更好的擴增特異性、更高的擴增效率及更好的復(fù)孔重復(fù)性，檢測靈敏度更高。

注意事項:

1. 建議使用新鮮采取的動物組織，若為長期冷凍組織，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融，否則會導(dǎo)致模板的降解，影響PCR效率。

2. 試劑Buffer AL若低溫保存，易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時間，也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min，以溶解沉淀，混勻后再使用。

3. 電泳檢測時，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則，電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團拖尾亮帶，影響實驗結(jié)果。

4. 建議擴增片段長度1 kb以內(nèi)，以便擴增效率佳。

5. 為了您的安全和健康，請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。

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