

上海滬崢生物科技有限公司
主營產(chǎn)品: ELISA試劑盒, 生化試劑, 標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品, PCR檢測(cè)試劑盒, 抗體, 培養(yǎng)基, 細(xì)胞
牛肺疫支原體(MB)檢測(cè)試劑盒(PCR法)
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上海滬崢生物科技有限公司
店齡6年
企業(yè)認(rèn)證
聯(lián)系人
李小姐
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經(jīng)營模式
生產(chǎn)商,貿(mào)易商,
所在地區(qū)
上海市奉賢區(qū)
牛肺疫支原體(MB)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR法)
操作步驟
1 病毒 RNA 的提取
1.1 取已處理的樣品、陰性對(duì)照和陽性對(duì)照,分別加入裂解液 600 μL,充分顛倒混勻,室溫靜置 3~
5 min。
1.2 將液體吸入吸附柱中(吸附柱要套上收集管,吸取液體時(shí)盡量不要吸到懸浮雜質(zhì),以免離心時(shí) 堵塞吸附柱),13000 rpm 離心 30 s。
1.3 棄去收集管中液體,加入 600 μL 洗液,13000 rpm 離心 30 s。
1.4 重復(fù)步驟 1.3。
1.5 棄去收集管中液體,13000 rpm 空柱離心 2 min,以除去殘留的洗滌液。
1.6 將吸附柱移入新的 1.5 mL 離心管中,向柱中央加入洗脫液 50 μL,室溫靜置 1 min,13000 rpm
離心 30 s,離心管中液體即為模板 RNA。
結(jié)果判定
1 結(jié)果分析條件設(shè)定 閾值設(shè)定原則:閾值線設(shè)定于剛好超過陰性對(duì)照擴(kuò)增曲線的點(diǎn)。不同儀器可根據(jù)儀器噪音
情況進(jìn)行調(diào)整。
牛肺疫支原體(MB)核酸檢測(cè)試劑盒(PCR法) 2 結(jié)果描述及判定
陽性對(duì)照 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線,陰性對(duì)照無 Ct 值并且無特定擴(kuò)增曲線,實(shí)驗(yàn)結(jié)果成 立;被檢樣品 Ct 值≤30 并出現(xiàn)特定的擴(kuò)增曲線為 AIV 陽性;被檢樣品 30<Ct<37 并出現(xiàn)特定的擴(kuò) 增曲線,需重新取樣提取 RNA,擴(kuò)增后進(jìn)行結(jié)果判定,如仍是可疑,可判定為陽性;被檢樣品 Ct 值≥37 時(shí),超過本方法檢測(cè)靈敏度范圍,判定為陰性;對(duì)于某些未呈現(xiàn) S 型曲線,但本底較高的樣 品,應(yīng)為陰性。
◆ 注意事項(xiàng)
1.本試劑檢測(cè)靈敏度高。為了防止污染,實(shí)驗(yàn)要分區(qū)操作。
1)第一區(qū):樣本制備區(qū)。
2)第二區(qū):模板添加區(qū)。
3)第三區(qū):擴(kuò)增及產(chǎn)物分析區(qū)。
★ 分區(qū)之間*進(jìn)行物理性隔離,避免人為因素造成的污染。
2.實(shí)驗(yàn)過程中穿戴工作服和乳膠手套,不同區(qū)域獨(dú)立使用工具,需更換手套和實(shí)驗(yàn)服。
3.嚴(yán)格按照操作步驟操作,試劑配制和加樣等步驟請(qǐng)嚴(yán)格按照說明書要求在冰盒上操作。
4.反應(yīng)液中的成分對(duì)光敏感,應(yīng)避光保存。試劑使用前要完全解凍,但應(yīng)避免反復(fù)凍融,推薦使用前離心30秒,并按檢測(cè)頻次將反應(yīng)液以適當(dāng)體積分管保存。
5.反應(yīng)結(jié)束后,擴(kuò)增管請(qǐng)置于密封袋內(nèi)丟棄,當(dāng)日清理,開蓋易造成氣溶膠污染,禁止開蓋。
6.不同批號(hào)試劑請(qǐng)勿混合使用,在有效期內(nèi)使用。

