v> 背景:
在體內(nèi),基底膜是以細胞為基礎的薄層細胞外基質(zhì)。ABW ?Matrigengel 無
酚紅基底膜基質(zhì)是一種可溶性的基底膜制劑,這種基質(zhì)是通過基因編
輯技術(shù)將多種表達膠原蛋白的基因序列插入到經(jīng)永生化處理的小鼠
子宮肌瘤細胞系中,并在實體腫瘤中抽提出來的。它的主要成分是層粘連
蛋白,接著是膠原蛋白Ⅳ、硫酸乙酰肝素蛋白多糖和巢蛋白1,2。ABW?
Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)也含有轉(zhuǎn)化生長因子 β、表皮生長因子、
類胰島素生長因子、成纖維細胞生長因子、組織纖溶酶原激活物3,4 和在腫
瘤中自然出現(xiàn)的其他生長因子。ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)
對正常和變換的錨著依賴性上皮樣細胞和其他細胞類型的附著和分化
是有效的。這些細胞類型包括神經(jīng)元5,6、肝細胞7、支持細胞8,9、小雞晶狀
體上皮細胞10 和血管內(nèi)皮細胞11。在成年大鼠肝細胞12,13、血管內(nèi)皮細胞 14 以
及小鼠15-18 和人19,20 乳腺上皮細胞的三維細胞培養(yǎng)中ABW? Matrigengel
無酚紅基底膜基質(zhì)會影響基因的表達。這是幾種類型腫瘤細胞侵襲的
基礎21,22,支持體內(nèi)末梢神經(jīng)再生23-25,并提供體外26,27 和體內(nèi)25,28-30 血
管再生研究的必需底物。ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)也支持在
免疫抑制小鼠中人類腫瘤的增殖31-33。ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基
質(zhì)能用于未分類乳腺細胞的移植34, 以及分類的上皮細胞亞群嵌入
ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)35,36。這一基質(zhì)也被用作為癌癥干細
胞模型并被證明在體內(nèi)能增強腫瘤生長速率37。
來源:
經(jīng)基因編輯的小鼠子宮肌瘤細胞
制劑:
達爾伯克改良伊格爾培養(yǎng)基和 50 μg/mL 慶大霉素。ABW? Matrigengel 無
酚紅基底膜基質(zhì)適合所有的培養(yǎng)基。
儲存:
儲存在-20℃ 時是穩(wěn)定的。通過分裝并一次性使用分裝物來最小化產(chǎn)品的
凍融。在-20℃ 冰箱中儲存分裝物直到準備使用。請不要儲存在無霜冰箱
中。請保持產(chǎn)品的凍結(jié)。
有效日期:
ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)的有效日期是批次特異的,您可以
在產(chǎn)品的分析證明書中找到,在-20℃ 條件下能儲存24個月以上。
警告:
因為ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)在10℃ 以上會開始凝膠
化,所以極其重要的是ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)和所有的
進入與ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)接觸的培養(yǎng)皿或培養(yǎng)基都
應 該 預 冷 。在 實 驗的 全 部 過 程 中 請 保 持 ABW? Matrigengel 無
酚 紅 基 底 膜 基 質(zhì) 處 于 冰上。
重構(gòu)和使用:
在ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)小瓶凍融的過程中可能會發(fā)生顏色上海諾娃醫(yī)藥科技有限公司
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的變化,由于二氧化碳和碳酸氫鹽緩沖液以及酚紅的作用,顏色會從淡黃色變化到深紅色。顏色
的變化是正常的,不會影響產(chǎn)品的功效,顏色將會在5%CO2 平衡下消失。
請將小瓶淹沒在冰中并放置在 4℃ 冰箱里過夜解凍 ABW? Matrigel 基質(zhì)。一旦ABW?
Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)被解凍,請渦旋小瓶以確保材料的均勻分散。請將ABW?
Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)全程保持在冰上。請使用無菌技術(shù)處理。請將解凍的ABW?
Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)放置在無菌的區(qū)域,在小瓶的頂部噴灑70% 的乙醇并風干。
使用預冷的移液管輕柔的吸取ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)以確保其均勻性。將
ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)分裝到離心管中,每當ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基
質(zhì)堵塞吸頭和/或移液管測量不精確時請更換吸頭。如果將材料放置在 4℃ 的冰上 24-48 個小時,
凝膠化的ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)可能會被重新水化。
ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)可以被用來作薄層凝膠(0.5 mm),細胞可以接種在其頂
部。當作為 1 mm 凝膠層使用時,細胞也可以在ABW? Matrigengel 無酚紅基底膜基質(zhì)的內(nèi)部培
養(yǎng)。大量的稀釋將會導致 1 個薄的、非凝膠化的蛋白層。這對于細胞附著是有用的,但是在分
化研究中可能不起作用。
使用方法