ATCC貨號：CRL-1582

MOLT-4(急性淋巴母細胞白血病細胞培養(yǎng))的典型生長模式圖。此半對數(shù)圖顯示了細胞密度與培養(yǎng)時間之間的關系。培養(yǎng)的細胞通常按照標準生長模式增殖。細胞接種后 個生長階段是延滯期，此階段細胞生長緩慢，處于適應培養(yǎng)環(huán)境、為快速生長做準備的狀態(tài)。延滯期之后是對數(shù)期，此階段細胞呈指數(shù)增殖，消耗生長培養(yǎng)基中的營養(yǎng)素。當所有生長培養(yǎng)基均被耗盡 (即：一種或多種營養(yǎng)素耗竭) 或者細胞已占據(jù)所有可用基質時，細胞即進入靜止期 (即：平臺期)，其增殖速度大大降低甚至完全停止。

MOLT-4(急性淋巴母細胞白血病細胞培養(yǎng))成纖維細胞  (或者成纖維細胞樣細胞)  為雙極或多極細胞，呈細長形，貼附在基質上生長。

MOLT-4(急性淋巴母細胞白血病細胞培養(yǎng))下列建議僅為實驗室安全規(guī)范的指導原則，不應將其視為完整的工作準則。請咨詢您所 在機構的安全委員會，遵守當?shù)赜嘘P實驗室安全的規(guī)章制度。

有關微生物學標準規(guī)范的更多信息以及具體生物安全等級指導原則，請參閱《微生物和 生物醫(yī)學實驗室生物安全》第五版

? 必須始終穿戴適當?shù)膫€人防護設備。手套污染時應更換，將用過的手套與其他污染的

實驗室廢物一起處置。

?   操作可能具有危害的物質后以及離開實驗室前應洗手。

?   在實驗室內(nèi)不得進食、飲水、吸煙、處理隱形眼鏡、涂抹化妝品或者存放供人食用的

食物。

?   遵守所在機構關于銳器(即：針頭、手術刀、吸管和破裂的玻璃器皿)安全操作的準則。

?   小心操作，盡量避免形成氣體揮發(fā)和/或潑濺。

?   實驗開始前、結束后以及可能具有傳染性的物質發(fā)生潑濺時，應立即使用適當?shù)娜ノ蹌λ泄ぷ髋_面進行去污。無論實驗室設備是否被污染，均應定期進行清潔。

?   在對可能具有傳染性的物質進行處置前應先去除污染。

?   發(fā)生事故可能導致感染性物質暴露時，應向相應人員  (例如：實驗室主管、安全員) 報告。

MOLT-4(急性淋巴母細胞白血病細胞培養(yǎng))無菌技術

細胞培養(yǎng)的成功很大程度上取決于保護細胞免受細菌、真菌和病毒等微生物的污染。非無菌物品、培養(yǎng)基和試劑、帶有微生物的空氣顆粒、不干凈的培養(yǎng)箱和污染的工作臺面均是導致微生物污染的來源。

無菌技術的作用是在環(huán)境微生物與無菌的細胞培養(yǎng)物之間形成一道屏障，它通過一套操作流程來降低培養(yǎng)物被上述污染源污染的可能。無菌技術的組成要素包括：無菌工作區(qū)域、良好的個人衛(wèi)生、無菌試劑和培養(yǎng)基以及無菌操作。

無菌工作區(qū)域

最為簡單、經(jīng)濟的減少空氣顆粒和氣體揮發(fā)  (例如：灰塵、芽孢、皮屑、噴嚏)  污染的方法就是采用細胞培養(yǎng)通風櫥。

?   細胞培養(yǎng)通風櫥應正確設置，放置于專門用于細胞培養(yǎng)的區(qū)域，同時要避免來自門、窗及其他設備的氣流，不能有直接的來往通道。

?   工作臺面應保持整潔，只放置特定實驗所需的物品；不能用作儲存區(qū)域。

?   使用前后均應 消毒工作臺面，周圍區(qū)域和設備應定期清潔。

?   常規(guī)清潔時，工作前和工作過程中，特別是發(fā)生潑濺后，應使用 70% 乙醇擦拭工作臺面。

?   使用完畢后，可用紫外燈對細胞培養(yǎng)通風櫥內(nèi)空氣和暴露在外的工作臺面進行消毒。

?   在細胞培養(yǎng)通風櫥內(nèi)不需要也不建議使用煤氣燈火焰。

? 細胞培養(yǎng)通風櫥應始終保持運轉，長時間不使用時方可關閉。

病毒

病毒是一種微觀感染性物質，利用宿主細胞結構進行復制。病毒體積極小，因而要檢測培養(yǎng)物中有無病毒以及將其從細胞培養(yǎng)實驗室所用試劑中去除都十分困難。由于大多數(shù)病毒對宿主有非常嚴格的要求，因此一般不會對與其宿主物種不同的細胞培養(yǎng)物造成不良影響。但是，使用病毒感染的細胞培養(yǎng)物時卻會對實驗室工作人員造成嚴重的健康威脅，特別是當實驗室培養(yǎng)的是人或靈長類動物細胞時。通過電子顯微鏡檢查、一組抗體的免疫染色、ELISA  實驗或者采用適當病毒引物的 PCR 技術可以檢測出細胞培養(yǎng)物的病毒污染。

支原體

支原體是一種沒有細胞壁的簡單細菌，被認為是能夠自我復制的最小的生物。由于體積極小(一般小于 1 微米)，支原體的檢測十分困難，除非其達到極高的密度，導致細胞培養(yǎng)物變質，在此之前往往沒有明顯的感染征象。有些生長緩慢的支原體可能會在培養(yǎng)物中持續(xù)存在，而不會導致細胞死亡，但是這些支原體會改變培養(yǎng)體系中宿主細胞的行為和代謝。慢性支原體感染的可能表現(xiàn)包括：細胞增殖速度降低、飽和密度下降以及懸浮培養(yǎng)物凝集；但是，*切實有效的檢測支原體污染的方法就是采用熒光染色  (例如：Hoechst 33258)、ELISA、PCR、免疫染色、放射自顯影或者微生物學測定技術定期檢測培養(yǎng)物。

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