概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實(shí)現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

犬腺體病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒運(yùn)輸方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項(xiàng)：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計(jì)與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報(bào)告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

fAgomelatine  中文名：阿戈美拉汀  分子式：C15H17NO2    肌醇   25g

Afatinib  中文名：阿法替尼  分子式：C24H25ClFN5O3    Inositol   100g              

Adynerigenin β-neritrioside  中文名：  分子式：C42H64O17    抑瘤素   英文名稱：    M   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   OSM

Adrenosterone  中文名：腎上腺甾酮  分子式：C19H24O3    骨鈣素   英文名稱：   Osteocalcin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   OC

Adipic dihydrazide  中文名：己二酸二  分子式：C6H14N4O2    催產(chǎn)素   英文名稱：   Oxytocin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   OT

血液基因組DNA中量提取試劑盒(離心柱型)   Blood genomic DNA Exaction Kit (cenifugal column type)  Periplocoside F  中文名：  分子式：C63H104O23  度：98.0%

血液基因組DNA大量提取試劑盒(離心柱型)   Blood genomic DNA Exaction Kit (cenifugal column type)  Periplocoside F  中文名：  分子式：C63H104O23 

血液RNA試劑盒   50T  Periplocogenin  112899-63-5  中文名：  分子式：C28H42O6  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

血液DNA提取試劑盒(溶液型）   10ml（血量）  Tranexamic acid  1197-18-8  中文名：凝血酸  分子式：C8H15NO2  度：98.0%   

血液DNA大量提取試劑盒   5T  Periplocogenin  中文名：  分子式：C28H42O6  度：98.0%

Benzoyl-DL-methionine  4703-38-2  中文名：苯甲酰基-DL-蛋氨酸  分子式：C12H15NO3S    二氫二醇脫氫酶   英文名稱：   Human Dihydrodiol Dehydrogenas 2   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DDH2

Bindone  1707-95-5  中文名：雙茚二酮  分子式：C18H10O3    多巴胺   英文名稱：   Human Dopamine   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DPN

Benzyl carbazate  5331-43-1  中文名：肼基甲酸芐酯  分子式：C8H10N2O2    強(qiáng)啡肽   英文名稱：   Human Dynorphin   規(guī)格：   48T/96T   英文縮寫：   DYN

5-Benzoylpentanoic acid  4144-62-1  中文名：5-苯甲?；焖?/span>  分子式：C12H14O3    鼠疫桿菌(YP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

7-Benzyloxyindole  20289-27-4  中文名：7-芐氧基吲哚  分子式：C15H13NO    鼠疫桿菌(YP)核酸檢測試劑盒   48T

犬腺體病毒1型探針法熒光定量PCR試劑盒運(yùn)輸人信號素4D(SEMA4D)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human SEMA4D (Semaphorin 4D) ELISA Kit                    3,3-Dimethylacrylic acid  中文名：千里光酸  分子式：C5H8O2 

人心肌錨蛋白重復(fù)域1elisa試劑盒   人心肌錨蛋白重復(fù)域1試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人心肌錨蛋白重復(fù)域1試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人心肌錨蛋白重復(fù)域1試劑盒、人心肌錨蛋白重復(fù)域1 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     3-(Boc-Amino)piperidine  中文名：  分子式：C10H20N2O2 

人相關(guān)抗原(TAA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  2-Cyclopropyl-4-(4-fluorophenyl)-quinolyl-3-methanol  中文名：  分子式：C19H16FNO  度：98.0%

人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G1(ABCG1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human ABCG1 (ATP Binding Cassette anspoer G1) ELISA Kit  2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  中文名：  分子式：C19H20N4  度：98.0%

人腺苷三0酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human ABCA1(ATP Binding Cassette anspoer A1) ELISA Kit                 2-n-Propyl-4-methyl-6-(1-methylbenzimidazole-2-yl)benzimidazole  中文名：  分子式：C19H20N4