概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴(kuò)增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度的變化來對PCR反應(yīng)進(jìn)行實(shí)時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實(shí)現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟：

松鼠葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒運(yùn)輸方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增。一般：在93℃預(yù)變性3-5min，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：

1．基礎(chǔ)程序；

2．?dāng)U增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動力學(xué)；

8．PCR擴(kuò)增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點(diǎn)擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實(shí)現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強(qiáng)、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點(diǎn)，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細(xì)胞mRNA表達(dá)量的變化；比較不同組織的mRNA表達(dá)差異；驗(yàn)證基因芯片，siRNA干擾的實(shí)驗(yàn)結(jié)果等。我公司為您提供全套實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實(shí)驗(yàn)皆使用進(jìn)口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細(xì)的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進(jìn)行Real Time PCR實(shí)驗(yàn)，進(jìn)行實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析。

（04）實(shí)驗(yàn)完成后，提供完整的實(shí)驗(yàn)報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實(shí)驗(yàn)材料。

3、熒光定量PCR的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進(jìn)行不同的收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

f兔乳鐵傳遞蛋白elisa試劑盒   兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔乳鐵傳遞蛋白試劑盒、兔乳鐵傳遞蛋白elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  5-Androsten-3β-ol-17-one ethyleneketal  7745-40-6  中文名：  分子式：C21H32O3  度：98.0%   

兔乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISAkit   ELISA.   96T/48T  5-Aminouracil  932-52-5  中文名：5-氨基尿嘧啶  分子式：C4H5N3O2  度：98.0%   

兔溶菌酶(LZM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  5-Aminosalicylic acid  中文名：5-氨基水楊酸  分子式：C7H7NO3  度：98.0%

兔熱休克蛋白90elisa試劑盒   兔熱休克蛋白90試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔熱休克蛋白90試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔熱休克蛋白90試劑盒、兔熱休克蛋白90 elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  5-Benzimidazolecarboxylic acid  15788-16-6  中文名：5-苯并咪唑甲酸  分子式：C8H6N2O2 

兔熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝           5-Benzoylpentanoic acid  中文名：5-苯甲?；焖?/span>  分子式：C12H14O3

Senkyunolide G  中文名：洋川芎內(nèi)酯G  分子式：C12H16O3  度：%  兔子可溶性細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Senkyunolide C  中文名：洋川芎內(nèi)酯C  分子式：C12H12O3  度：96.0%  兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

Docosanoic acid  中文名：二十二烷酸  分子式：C22H44O2  度：%  兔子可溶性細(xì)胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝        

Pilosol A  中文名：  分子式：C13H12O  度：%  兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體elisa試劑盒   兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體試劑盒、兔子可溶性內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

Glycerol  中文名：甘油  分子式：C3H8O3  度：%  兔子睪elisa試劑盒   兔子睪試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   兔子睪試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：兔子睪試劑盒、兔子睪elisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgAelisa試劑盒   小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA試劑盒、小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgAeisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Ergosta-5,24(28)-diene-3β,7α,16β-triol  289054-34-8  中文名：  分子式：C28H46O3  度：97.5%  關(guān)鍵詞：  麥角甾烷; 植物提取物; 天然產(chǎn)物; 天然產(chǎn)物庫

小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  ER-878898  122111-11-9  中文名：  分子式：C20H18F2O8S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠抗肌內(nèi)膜抗體IgA(EMAIgA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  Eplerenone  中文名：依普利酮  分子式：C24H30O6  度：98.0%

小鼠抗紅細(xì)胞抗體elisa試劑盒   小鼠抗紅細(xì)胞抗體試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠抗紅細(xì)胞抗體試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠抗紅細(xì)胞抗體試劑盒、小鼠抗紅細(xì)胞抗體eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     Ergosta-5,24(28)-diene-3β,7α,16β-triol  289054-34-8  中文名：  分子式：C28H46O3 

小鼠抗紅細(xì)胞抗體(RBC)ELISAKit   ELISA.   96T/48T  L-(+)-Arginine  74-79-3  中文名：L-(+)-精氨酸  分子式：C6H14N4O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞：

松鼠葡萄球菌探針法熒光定量PCR試劑盒運(yùn)輸Ethyl2-((tert-butoxycarbonyl)amino)-3-nitrobenzoate  136285-65-9  中文名：  分子式：C14H18N2O6    人抵抗素(Resistin)ELISAKIT   ELISA.   96T/48T

Trenbolone cyclohexylmethylcarbonate  23454-33-3  中文名：群勃龍環(huán)己甲基碳酸酯  分子式：C26H34O4    人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

Ceftiofur hydrochloride  103980-44-5  中文名：頭孢噻呋鹽酸鹽  分子式：C19H18ClN5O7S3    人骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T           

Cefquinome  84957-30-2  中文名：頭孢喹咪  分子式：C23H24N6O5S2    人阻抑素(PHB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human PHB (Prohibitin) ELISA Kit

Stanozolol  10418-03-8  中文名：康力龍  分子式：C21H32N2O    人隱花色素1(CRY1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒   Human CRY1 (Cryptochrome 1) ELISA Kit