概述：

熒光定量PCR的基本原理就是在PCR擴增過程中，隨著PCR循環(huán)數(shù)的遞增，PCR產(chǎn)物不斷積累，熒光信號也會相應(yīng)的增加，這樣就可以通過熒光強度的變化來對PCR反應(yīng)進行實時的監(jiān)測。本公司根據(jù)您的科研需求可以提供SYBR Green染料法和TaqMan探針法。通過對DNA或RNA的熒光定量PCR監(jiān)測, 實現(xiàn)基因的相對定量、定量和定性分析。

PCR實驗方法步驟：

方法：

1：在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。     

10×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物1（10pM）                 

2 μl     引物2（10pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

1 μl     DNA模板（50ng-1μg/μl）  

1 μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。

2：調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。

3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應(yīng)管中加有石蠟油，需用100μl氯仿進行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。

注意事項：

白斑綜合癥病毒探針法熒光定量PCR試劑盒廠家1．基礎(chǔ)程序；

2．擴增溫度和延伸溫度；

3．反應(yīng)時間；

4．循環(huán)次數(shù)；

5．PCR 反應(yīng)液的配制；

6．PCR技術(shù)的基本原理；

7．PCR的反應(yīng)動力學；

8．PCR擴增產(chǎn)物；

9．PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。點擊了解更公司產(chǎn)品。

探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖：

熒光定量PCR服務(wù)：

簡介：實時熒光定量PCR技術(shù)于1996年由美國Applied Biosystems公司推出，該技術(shù)不僅實現(xiàn)了PCR從定性到定量的飛躍，而且與常規(guī)PCR相比，它具有特異性更強、有效解決PCR污染問題、自動化程度高等特點，目前該技術(shù)已被廣泛用于檢測細胞mRNA表達量的變化；比較不同組織的mRNA表達差異；驗證基因芯片，siRNA干擾的實驗結(jié)果等。我公司為您提供全套實時熒光定量PCR技術(shù)服務(wù)，全部實驗皆使用進口試劑完成，主要定量PCR儀器。

1、熒光定量PCR服務(wù)要求：

（01）請您提供新鮮的且盡量多的材料；或直接提供純化好的總RNA（大于 5 ug/樣品）；或直接提供純化好的DNA（大于 5 ug/樣品）。

（02）請?zhí)峁┮阎娜L基因序列。

（03）請?zhí)峁┍M可能詳細的背景資料：DNA/RNA 來源等

2、熒光定量PCR操作程序

（01）引物（探針）設(shè)計與合成。

（02）提取DNA/RNA，樣本逆轉(zhuǎn)錄成cDNA。

（03）進行Real Time PCR實驗，進行實驗結(jié)果分析。

（04）實驗完成后，提供完整的實驗報告（含軟件分析結(jié)果）及引物等實驗材料。

3、熒光定量PCR的收費標準：

  我公司根據(jù)客戶的樣品數(shù)量進行不同的收費標準。

以下是公司正在熱銷產(chǎn)品產(chǎn)品：

檸檬酸（CA）含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣              Rizatriptan benzoate  145202-66-0  中文名：苯甲酸利扎曲坦  分子式：C22H25N5O2 

鎳快速測試盒   Nickel rapid test case  Ranitidine  66357-35-5  中文名：雷尼替丁  分子式：C13H22N4O3S  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

鎳測試盒   Nickel test case  4-[2-(2-Amino-4,7-dihydro-4-oxo-1H-pymol[2,3-d]pyrimodin-5-yl)ethyl]benzoic acid methyl ester  中文名：  分子式：C16H16N4O3  度：98.0%

尿酸含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣              Tropisetron hydrochloride  105826-92-4  中文名：鹽酸托烷司瓊  分子式：C17H21ClN2O2 

尿激酶型纖溶酶原激活因子受體 (uPA-R)   作用：   ELISA   規(guī)格：   48T/96T   進口分裝     O-Benzyl-L-tyrosine  16652-64-5  中文名：O-芐基-L-酪氨酸  分子式：C16H17NO3

Ampicillin Trihydrate  7177-48-2  中文名：氨芐西林三水酸  分子式：C16H19N3O4S    普氏立克次體(RP)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

2-Acetylfluorene  781-73-7  中文名：2-乙酰芴  分子式：C15H12O    莫氏立克次體(RM)核酸檢測試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T              

1-Allyl-3,5-Dimethylpyrazole  13369-74-9  中文名：1-烯丙基-3,5-二甲基吡唑  分子式：C8H12N2    瑞氏－姬姆薩復合染液   Vascular permeability test solion

(1R,2S)-2-Amino-1,2-diphenylethanol  23190-16-1  中文名：(1R,2S)-2-氨基-1,2-二苯基乙醇  分子式：C14H15NO    姬姆薩染液   Peroxidase staining

5,6-Dimethyl-2-Benzothiazolamine  29927-08-0  中文名：5,6-二甲基-2-苯并噻唑胺  分子式：C9H10N2S    巴氏染液（脫落細胞染色）   Name小鼠β細胞素(BTC)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Boc-3-Phenylisoserine  145514-62-1  中文名：  分子式：C14H19NO5  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠β葡萄糖酸苷酶elisa試劑盒   小鼠β葡萄糖酸苷酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠β葡萄糖酸苷酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β葡萄糖酸苷酶試劑盒、小鼠β葡萄糖酸苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。     Loperamide hydrochloride  34552-83-5  中文名：鹽酸洛哌丁胺  分子式：C29H34Cl2N2O2 

小鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Boc-3-Phenylisoserine  145514-62-1  中文名：  分子式：C14H19NO5 

小鼠β葡糖苷酶elisa試劑盒   小鼠β葡糖苷酶試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   小鼠β葡糖苷酶試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：elisa試劑盒（進口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠β葡糖苷酶試劑盒、小鼠β葡糖苷酶eisa試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。  Loperamide hydrochloride  34552-83-5  中文名：鹽酸洛哌丁胺  分子式：C29H34Cl2N2O2  度：98.0%  關(guān)鍵詞： 

小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)ELISA試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝  Bisphenol P  中文名：雙酚P  分子式：C24H26O2  度：98.0%

白斑綜合癥病毒探針法熒光定量PCR試劑盒廠家Cleroindicin E  165197-71-7  中文名：  分子式：C8H14O3    HumanDickkopf1,DKK1ELISA試劑盒人Dickkopf1(DKK1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Methyl levulinate  624-45-3  中文名：  分子式：    組織MSK1激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次

Cleroindicin C  183626-28-0  中文名：  分子式：C8H12O3    HumanPhospholipaseCγ1,PLCγ1ELISAKit人0酯酶Cγ鏈(PLCγ1)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

Cleroindicin B  107389-91-3  中文名：  分子式：C8H14O3    兔子神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

Cleroindicin F  189264-47-9  中文名：  分子式：C8H10O3    Human adaptor protease activating factor 1 (APAF1) ELISA Kit 人銜接蛋白酶活化因子1(APAF1)ELISA試劑盒