上海滬崢專業(yè)生產銷售雞減蛋綜合征病毒PCR診斷試劑盒現(xiàn)貨，我公司供應的分子生物學試劑品類齊全，且具有優(yōu)勢價格，歡迎新老客戶咨詢認購。

產品詳細信息

名稱：雞減蛋綜合征病毒PCR診斷試劑盒

規(guī)格： 20T/50T

品牌：上海滬崢

【用途】 用于雞減蛋綜合征病毒病的檢測、診斷和流行病學調查。

【操作步驟】

1. 病料處理

   取適量輸卵管、卵巢、心、脾、肺臟等組織病料，于滅菌研缽充分研磨，用Hanks液或PBS按照1：3稀釋成均勻乳劑， -20℃ 反復凍融3次以上。

2. DNA的提取

(1) 取已凍融好的病料，1000rpm離心5min，取上清200μl（或質控樣品T，200μl），加25μl TU-1和3μl TU-2， 50℃ 水浴1～2h，期間輕柔振蕩幾次幫助裂解。

（2）加入200μl SR-I，劇烈顛倒輕搖充分混勻， 70℃ 放置10min。

（3）冷卻后加入100μl異丙醇，充分混勻后，加入一個吸附柱（試劑盒內提供）中（吸附柱放入收集管中）10000rpm離心30秒，棄掉收集管中的廢液。

（4）加入500μl SR-Ⅱ，10000rpm離心30秒，棄廢液。

（5）加入700μl SR-Ⅲ，10000rpm離心30秒，棄廢液。

（6）再加入500μl SR-Ⅲ，10000rpm離心30秒，棄廢液。

（7）將吸附柱放回空收集管，13000rpm離心2min。

（8）取出吸附柱，放入一個干凈的離心管中，在吸附膜的中間部位加入70μl TU-3（使用前事先預熱至65 -70℃ ，有助于提高洗脫效果），室溫放置3～5min，12000rpm離心1min，將得到的溶液重新加入離心吸附柱中，室溫放置2min，12000rpm離心1min。

（9）洗脫液即為模板，可放在2～8℃，如果要長時間存放，可以放置在 -20℃ 。

 3 .PCR操作 

4.電 泳

配制1%瓊脂糖凝膠，取PCR產物5uL混合1μl TU-7，加樣于凝膠孔中，同時在相鄰孔加3μl TU-8，在120v 電壓下，1×TAE液中電泳15分鐘，在紫外成像儀下觀察結果。

【結果判定】

    在380bp 位置出現(xiàn)擴增帶，實驗結果為陽性

【結果判定】

    在380bp 位置出現(xiàn)擴增帶，實驗結果為陽性

雞減蛋綜合征病毒PCR診斷試劑盒

【注意事項】

1. 每次使用，開蓋之前請先瞬時離心，使試劑沉于管底。

2. 所有試劑在要求溫度下保存，-20℃保存試劑盡量減少反復凍融，使用后的試劑立即放回，避免在室溫擱置太久。

3. 盡量建立PCR試驗操作區(qū)，避免交叉污染。

4. 加樣和反應程序嚴格按照說明書進行，由于操作失誤、移液器不精確、定時不準確造成無結果情況，不予負責。

5. 吸頭、離心管和PCR管在使用前，要高壓滅菌，操作過程盡量不要用手接觸到管內壁，可用鑷子夾取。

6. 注意防止試劑污染，在有效期限前用完。

血清學診斷技術

 血清學診斷技術是建立在抗原與相應抗體在體外發(fā)生特異性結合反應基礎上的檢測技術，隨著科學技術的不斷發(fā)展和提高，血清學抗體檢測新技術層出不窮，應用面也日益擴大。如病毒中和試驗、血凝和血凝抑制試驗、瓊脂凝膠擴散試驗、血清平板和試管凝集試驗、免疫膠體金層析技術、酶聯(lián)免疫吸附試驗等，這些試驗方法已被大多數(shù)實驗室熟練掌握應用。如布病采用平板或試管凝集試驗，禽流感和新城疫采用血凝和血凝抑制試驗，豬瘟和口蹄疫采用間接血凝試驗；采用 ELISA 試驗檢測禽流感、豬瘟、口蹄疫等疫病，養(yǎng)殖場也可采用血凝試驗和免疫金標技術來檢測免疫抗體滴度，操作簡便快速，使抗體監(jiān)測技術真正得以推廣 , 切實為動物疫病防控提供有力的幫助。