小鼠肺成纖維細胞【MouseLung:NormalLungFibroblasts】
產(chǎn)品描述：小鼠肺成纖維細胞分離自正常小鼠肺組織，呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞的功能主要是生產(chǎn)的Ⅲ型膠原蛋白，彈性蛋白和蛋白多糖作用于肺泡壁細胞外基質(zhì)。肺損傷后的修復(fù)和重塑功能，在肺部炎癥時可有效控制炎癥擴散。公司提供的小鼠肺成纖維細胞，均來自新鮮組織。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠肺成纖維細胞培養(yǎng)試劑盒(MouseLungPrimaCell:NormalLungFibroblastsCatNo.3-4085)來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下，小鼠肺成纖維細胞可以保持原代細胞的分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件，以降低雜細胞的污染，同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標準的操作流程下，原代細胞可以保持分化狀態(tài)，進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復(fù)蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項：
1. 接收到小鼠肺成纖維細胞，肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照（建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
人子宮內(nèi)膜腺癌細胞;HEC-1-B2,3,6,7,10,11-六乙酰氧基三亞苯(>98.0%(HPLC))2,3,6,7,10,11-Hexaacetoxytriphenylene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)

SiHa細胞，子細胞 人鼻咽癌母系細胞,CNE-2Z細胞 CL-0240V79(倉鼠肺細胞)5×106cells/瓶×22,3,6,7,10,11-六溴三亞苯(>98.0%(T))2,3,6,7,10,11-Hexabromotriphenylene質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-HCV-p71-溴-4-正辛基苯(>90.0%(GC))1-Bromo-4-n-octylbenzene質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(GC)

FIGF Others Human 人 VEGF-D / VEGFD / FIGF 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-溴-4-癸基苯(>88.0%(GC))1-Bromo-4-decylbenzene質(zhì)量規(guī)格：>88.0%(GC)

肺血管平滑肌細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)1-溴-4-十二烷基苯(>90.0%(GC))1-Bromo-4-dodecylbenzene質(zhì)量規(guī)格：>90.0%(GC)
小耳豬肺細胞;SEP-L1女貞苷（標準品）Ligustroflavone質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

A-427細胞，人肺癌細胞 小鼠成纖維細胞,L929細胞 CM-R103大鼠腦靜脈血管平滑肌細胞完全培養(yǎng)基100mL夏佛塔苷（標準品）Schaftoside質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

RM-1(小鼠前列腺癌細胞) 5×106cells/瓶×2二氫小檗堿（標準品）9,10-Dimethoxy-2,3-(methylenedioxy)-13,13a-didehydrob質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

Gibco 10486025 EXPRESS FIVE SFM..昆蟲培養(yǎng)基 1000ml桔紅素;桔皮素(標準品)Tangeretin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

人支氣管上皮細胞cDNAHBEpiC cDNA桔紅素;桔皮素Tangeretin質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%,BR
U-2 OS細胞，骨肉瘤細胞 人二倍體細胞系,KMB-17細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;NIH/3T3膠原酶shēng huà shì jì容量：25克

小鼠T瘤細胞(雞OVA基因修飾);E.G7-OVA2,3-環(huán)氧炳基-4-氧基本基迷 2,3-qPOXYPROPYL-4-MqTHOXYPHqNYL qtqr 11-94-1

FZD1 Others Mouse 小鼠 FZD1 人細胞裂解液 (陽性對照) 透析袋3500shēng huà shì jì容量：1000u

人脈絡(luò)叢成纖維細胞HCPF癸二酸二丁酯shēng huà shì jì容量：500毫克

FES Others Human 人 FES Kinase / Feline sarcoma oncogene 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 2-脫氧鳥苷-5-1酸鈉鹽(+4℃)NA
小鼠肺成纖維細胞HA Others H5N1 甲型流感 H5N1 (A/Hong kong/213/03) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) xy7noXYPROPYL-B-CYCLODEXTRIN羥基-B-環(huán)糊精高級5G128446-35-5RT

CM-R125大鼠牙細胞完全培養(yǎng)基100mL肖醋鉍 BisMuth Subnitnctq (cS);BisMuthyl nitnctq;BisMuth oxynitnctq;BisMuth nitnctq oxidq 1304-82-4

FAIM3 Others Human 人 FAIM3 人細胞裂解液 (陽性對照) ACESN-基甲酰甲基乙磺酸50毫克FMP，90%

小膠質(zhì)細胞培養(yǎng)基MM1,10-pxenANTHROLINEMONOHYDRATE 1,10-鄰二氮雜(鄰啰啉)蛋白組學(xué)級10G5144-89-8RT

Hep G2細胞，人肝癌細胞 人腎上腺皮質(zhì)腺癌細胞,SW-13細胞 人內(nèi)根鞘細胞HHIRSCPapain 5g/25g/100g原裝 Sigma P3250
操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。