小鼠晶狀體上皮細胞
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品牌 谷研
產(chǎn)品名稱 小鼠晶狀體上皮細胞
英文名稱 MouseEye:NormalLensEpithelialCells
貨號 GOY-Y6438
規(guī)格 詳見說明書
商品介紹

參數(shù)規(guī)格:
小鼠晶狀體上皮細胞MouseEye:NormalLensEpithelialCells
產(chǎn)品描述:哺乳動物晶狀體細胞包括兩種類型:晶狀體纖維細胞和晶狀體上皮細胞。單層上皮細胞覆蓋在纖維前表面。眼睛晶狀體的正常發(fā)育需要晶狀體上皮細胞不斷地分化,成熟。眼球液體中的生長因子將促進晶狀體上皮細胞分化。表皮生長因子促進有絲分裂,成纖維細胞生長因子,胰島素生長因子和胰島素促進它的遷移和分化。公司提供的小鼠晶狀體上皮細胞,采用膠原酶消化制備而來。細胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠晶狀體上皮細胞培養(yǎng)試劑盒(MouseEyePrimaCellNormalLensEpithelialCellsCatNo.3-4519)來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞(如脂肪細胞、纖維細胞等)的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標準的操作流程下,小鼠晶狀體上皮細胞傳5代仍可以保持原代細胞的分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細胞均來自新鮮組織,公司提供的小鼠源原代細胞均來自新鮮組織,用于培養(yǎng)該細胞的組織采集是根據(jù)國際標準方案進行。細胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細胞生長條件,以降低雜細胞的污染,同時保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標準的操作流程下,原代細胞可以保持分化狀態(tài),進而可以用于評估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

產(chǎn)品名稱

小鼠晶狀體上皮細胞

英文名稱

MouseEye:NormalLensEpithelialCells

貨號

GOY-Y6438

凍保存細胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(或隔夜)液氮槽vaporphase 長期儲存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長期儲存。*-20 不可超過1 小時, 以防止冰晶過大,造成細胞大量死亡,亦可跳過此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

實驗要點及說明
1.本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細胞培養(yǎng),懸浮細胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時動作要輕; 
4
.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率; 
5
.如果細胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
1)復(fù)蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?/span> 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查細胞密度。
2
)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。      
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3.
6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
人結(jié)膜成纖維細胞總RNAHConF NA醋酸卡貝縮宮素,卡比托辛Carbetocin質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR

CAT Others Human CAT / Catalase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) (±)-柚皮素(標準品)Naringenin 質(zhì)量規(guī)格:HPLC>90%,標準品

豚鼠心肌細胞;GP-H1二乙酰鳥嘌呤N(2),9-Diacetylguanine質(zhì)量規(guī)格:>95%

A-673細胞,橫紋肌瘤細胞 Hela細胞耐藥亞株,Hela/DDP細胞 小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1山姜素(標準品)Alpinetin質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標準品

雜交瘤(B);Z51B3C10H12A12G2F7B5埃博霉素AEpothilone A質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
中國倉鼠卵巢細胞;CHO茚地那韋-d6Indinavir-d6

CES1D Others Mouse 小鼠 CES3 / Carboxylesterase-3 / CES1D 人細胞裂解液 (陽性對照) 茚地那韋Indinavir

CL-0085GBC-SD(人膽囊癌細胞)5×106cells/瓶×2他唑巴坦,自由酸Tazobactam, Free acid

Hela/DDP細胞,Hela細胞耐藥亞株 人急性T母細胞白血病細胞,MOLT-4細胞 小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細胞(VAP33-GFP融合蛋白穩(wěn)定過表達);LA1-VAP33-GFP羧芐青霉素Carbenicillin

BEL-7404(人肝癌細胞) 5×106cells/瓶×2芬苯達唑砜Fenbendazole Sulfone
ACTE1
非洲爪蟾胚胎細胞HalfFraser培養(yǎng)基shēng huà shì jì容量:100

CL-0206SGC7901(人胃癌細胞)5×106cells/瓶×21-炔基環(huán)炳醇98+% 1-qTHYNYLCYCLOPqNTcNOL 17326-19-3

MLF, 小鼠成纖維細胞肌酸shēng huà shì jì容量:25

Sars結(jié)構(gòu)蛋白表達株;293sars181A 人膀胱上皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLBOC-D-亮酸shēng huà shì jì容量:25

人急性早幼粒白血病細胞;HL-60121-73-33-錄硝基本3-nitnochlorobenzene
小鼠晶狀體上皮細胞Tca-8113細胞,人舌癌細胞 鼠傷寒沙門氏菌Ta102 正常大鼠腎細胞;NRK三羥甲基基鹽酸鹽shēng huà shì jì容量:保存:-201

CXCL16 Protein Canine 重組狗 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (Fc 標簽)L-賴酸乙酯 L-Lysine ethyl ester dihydrochloride,... 3844-53-9 25G 通用試劑

MGC80-3(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠 FGFR2 / CD332 人細胞裂解液 (陽性對照) 異佛爾同二異青醋酯 isophoronq diisocycnctq 4098-71-9

黃牛皮膚細胞;BTA-S2丁基瓊脂糖凝膠4FFshēng huà shì jì容量:100

IL18R1 Others Cynomolgus 食蟹猴 IL18R1 人細胞裂解液 (陽性對照) 1100-88-5芐基三本基錄化膦 (BPP)Benzyltripxenylphosphonium chloride
收到小鼠晶狀體上皮細胞如何處理?
1
、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2
、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3
、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4
、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5
、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6
、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作。

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網(wǎng)址 http://www.bio-goy.com/
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