人胚胎絨毛膜細胞提取物
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品牌 谷研
產(chǎn)品名稱 人胚胎絨毛膜細胞提取物
英文名稱 Human Embryo : Normal Embryonic Chorion Cell Derivatives
貨號 GOY-Y6600
規(guī)格 詳見說明書
商品介紹

人胚胎絨毛膜細胞提取物Human Embryo : Normal Embryonic Chorion Cell Derivatives
產(chǎn)品描述:人胚胎絨毛膜細胞提取物是從人胚胎絨毛膜細胞提取的,人胚胎絨毛膜細胞從正常人胚胎絨毛膜組織制備。正常人胚胎絨毛膜組織采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRB HIPAA批準的方案進行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實驗的研究。
RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。             

cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機引物以及10mgRNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運輸cDNA1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。     

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin),離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF-80度保存。            潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克隆;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標測序;<4> Western and Northern Blot<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達圖譜。產(chǎn)品僅供科研使用

產(chǎn)品名稱

英文名稱

貨號

人胚胎絨毛膜細胞提取物

Human Embryo : Normal Embryonic Chorion Cell Derivatives

GOY-Y6600

細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640GIBCO,貨號21875-091)90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
二.細胞處理:
1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1215的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項:
1. 接收到人胚胎絨毛膜細胞提取物,肉眼觀察細胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數(shù)拍照(建議收到時的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時的細胞100X,200X各一張)。
產(chǎn)品僅供科研使用2.75%的酒精消毒(建議配置75%的酒精的水是滅菌過的)。
3.嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶。
4.將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出(嚴禁直接傾倒),放入另一無菌容器中(建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞)。
5.PBS 2-3ml/次輕輕洗細胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細胞變圓,輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細胞脫落,加入終止液終止。
6.1000rpm,5min離心,重懸細胞。
7.換新的細胞培養(yǎng)瓶,37℃,5%CO2培養(yǎng)。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
Burkkit瘤細胞;Daudi 大鼠腎小球內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mLPS48PS 48質(zhì)量規(guī)格:>99%,PDK1 activator

MMQ 小鼠垂體瘤細胞阿巴卡韋5'-β-D-葡萄糖苷酸Abacavir 5'-β-D-Glucuronide

FETUB Others Human Fetuin-B / FETUB 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-(三氟甲基)煙酰胺4-(Trifluoromethyl)nicotinamide

人非小細胞肺腺癌細胞;NCI-H19751-甲基-煙酰胺化物1-Methyl-nicotinamide Iodide

SLAMF6 Others Human SLAMF6 / Ly108 人細胞裂解液 (陽性對照) 煙酰胺-2,4,5,6-d4Nicotinamide-2,4,5,6-d4
非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS5A;Vero-HCV-NS5A鹽酸阿比朵爾(標準品)Arbidol HCl質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

C6, 大鼠腦膠質(zhì)瘤細胞阿加曲班Argatroban質(zhì)量規(guī)格:>99%,,細胞培養(yǎng)級

人癌細胞;MCF 7B 大鼠肺大動脈內(nèi)皮細胞完全培養(yǎng)基 100mL阿加曲班(標準品)Argatroban質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標準品

雪旺氏細胞Many types of cells包裝:5 × 105(1ml)醋酸精氨酸加壓素Argipressin Acetate質(zhì)量規(guī)格:度98%

EFNB2A Others Danio rerio (zebrafish) 斑馬魚 EFNB2A / Ephrin B2a 人細胞裂解液 (陽性對照) 阿替洛爾Atenolol質(zhì)量規(guī)格:度大于98%,USPgrade
斑馬魚尾鰭細胞;AB.9N-叔丁氧羰基-D-天冬酰,英文名或英文縮寫:Boc-D-asparagine,級別:BR,98%,規(guī)格:1

DPP4 Others Human DPPIV 人細胞裂解液 (陽性對照) ;芐基溴;α-溴本 Bqnzyl broMidq;ω-BroMotoluqnq

人肺癌細胞;A-427 [A427]葡聚糖凝膠 Sephade... Sephadex G-25 Superfine 9041-35-4 100G 分離試劑

人卵巢上皮細胞(HOSEpiC) ( 5×105 )司班85,英文名或英文縮寫:Span 85,級別:AR,87%,規(guī)格:100

CM-R056大鼠腎實質(zhì)細胞完全培養(yǎng)基100mLMaltExtract 100g/500g BD/Sigma分裝
人胚胎絨毛膜細胞提取物大鼠主動脈平滑肌細胞G-6-P-Naβ-D-葡萄糖-6-嶙酸鈉鹽100毫克高,98%

FCGR2A Others Human CD32a / FCGR2A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 3-羥基-5-甲基異惡唑 Hymexazol,97% 10004-44-1 5G 通用試劑

人主動脈內(nèi)皮細胞RNAHAEC miRNA5 μg醋醋拂輕;醋醋膚輕 Fluocinonidq 67-73-

SK-N-SH細胞,神經(jīng)母細胞瘤 人肺腺鱗癌細胞,NCI-H596細胞 人腦血管平滑肌細胞甲紅,英文名或英文縮寫:MR,級別:超,98%,規(guī)格:5

豚鼠源細胞63148-58-3甲基本基硅油Silicone oil (high temperature)
操作要點:
1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細胞能盡快通過最易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。

聯(lián)系方式
公司名稱 上海谷研實業(yè)有限公司
聯(lián)系賣家 郭小姐 (QQ:3004905818)
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手機 㠗㠓㠖㠒㠛㠓㠓㠓㠘㠔㠙
傳真 㠖㠒㠗-㠙㠗㠙㠒㠒㠔㠔㠗
網(wǎng)址 http://www.bio-goy.com/
地址 上海市松江區(qū)