人體脂肪組織提取物
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品牌 谷研
產(chǎn)品名稱 人體脂肪組織提取物
英文名稱 Fat: Normal Human Adipose Derivatives
貨號(hào) GOY-Y6883
規(guī)格 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
商品介紹

參數(shù)規(guī)格:
人體脂肪組織提取物Fat: Normal Human Adipose Derivatives
產(chǎn)品描述:人體脂肪存在于人體和動(dòng)物的皮下組織及植物體中,是生物體的組成部分和儲(chǔ)能物質(zhì)。公司科技提供來(lái)自新鮮或冷凍人體脂肪組織中高質(zhì)量的總RNA,PCR準(zhǔn)備的第一條cDNA鏈,蛋白質(zhì)及其亞組分。這些臨床定義的正常人體組織標(biāo)本采集自各地方醫(yī)院,采集工作根據(jù)IRBHIPAA批準(zhǔn)的方案進(jìn)行。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過(guò)嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
RNA制備:利用Qiagen RNeasy KitTrizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。生物科技提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測(cè)定結(jié)果等。             

cDNA制備:純化后的總RNA來(lái)合成cDNA第一鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mgRNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 μl cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過(guò)了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證產(chǎn)品的質(zhì)量。     

蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mM Tris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin),離心去除組織碎片,通過(guò)Bio-Rad蛋白檢測(cè)試劑盒測(cè)定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。            潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克?。?/span><2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測(cè)序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測(cè)與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。

產(chǎn)品名稱

人體脂肪組織提取物

英文名稱

Fat: Normal Human Adipose Derivatives

貨號(hào)

GOY-Y6883

凍保存細(xì)胞之方法?
冷凍保存方法一: 冷凍管置于4 30~60 分鐘-20 30 分鐘* → -80 16~18 小時(shí)(或隔夜)液氮槽vaporphase 長(zhǎng)期儲(chǔ)存。
冷凍保存方法二: 冷凍管置于已設(shè)定程序之可程序降溫機(jī)中每分鐘降1-3 –80 以下, 再放入液氮槽vapor phase長(zhǎng)期儲(chǔ)存。*-20 不可超過(guò)1 小時(shí), 以防止冰晶過(guò)大,造成細(xì)胞大量死亡,亦可跳過(guò)此步驟直接放入-80 冰箱中,惟存活率稍微降低一些。

實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明
1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
2
.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造,并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理; 
3
.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕; 
4
.如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過(guò)大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
5
.如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
培養(yǎng)操作:
產(chǎn)品僅供科研使用1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37水浴中迅速搖晃解凍,加 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?/span> 細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2
)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。      
1.
棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2.
1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。  
3.
6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4.
將細(xì)胞懸液按 12 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3
)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1.
細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細(xì)胞變圓 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm
離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3.
將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶1(ECE1)試劑盒 Rat Endothelin-conveing enzyme 1,ECE1 ELISA kit 米格列奈鈣(標(biāo)準(zhǔn)品)  Mitiglinide calcium Hydrate  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

大鼠內(nèi)皮素轉(zhuǎn)換酶2(ECE2)試劑盒 Rat endothelin conveing enzyme 2,ECE2 ELISA kit 米格列奈鈣  Mitiglinide calcium Hydrate  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

大鼠內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA檢測(cè)試劑盒RatEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 96T/48T 米格列奈鈣  Mitiglinide Calcium 

人甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)試劑盒 Human MBP/MBL ELISA Kit 阿扎那韋硫酸鹽(標(biāo)準(zhǔn)品)  Atazanavir sulfate  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

RatinhibinB,INH-BELISAKit大鼠抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 亞胺培南-西司他丁鈉  Imipenem and Cilastatin   質(zhì)量規(guī)格:含量:Imipenem400μg/mg,Cilastatin(C16H26N2O5S) 400μg/mg,USP36

BrdU標(biāo)記法細(xì)胞繁殖熒光定量檢測(cè)試劑盒10/50 長(zhǎng)春西丁,長(zhǎng)春西汀  Vinpocetine  質(zhì)量規(guī)格:>99%,BP,BR

Mouseisletcellaibody,ICAELISA試劑盒小鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 苯妥英鈉  Phenytoin   質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR

小鼠神經(jīng)趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA試劑盒 ,英文名: fractalkine/CX3CL1 ELISA Kit 奧卡西平  Oxcarbazepine  質(zhì)量規(guī)格:≥99.0%,BR

17-酮類(17-KS)ELISA檢測(cè)試劑盒Chicken17-ketosteroids,17-KSELISAKit 96T/48T 奧卡西平(標(biāo)準(zhǔn)品)  Oxcarbazepine  質(zhì)量規(guī)格:HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

5羥色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗體(IgG)試劑盒 Human 5HT IgG ELISA Kit 金絲桃素(標(biāo)準(zhǔn)品)  Hypericin  質(zhì)量規(guī)格:HPLC98%,標(biāo)準(zhǔn)品

英文名稱MouseIL-1ELISAKit小鼠白介素1(IL-1)規(guī)格:96T/48T D-葡萄糖-6-  D-+-Glucopyranose 6-phosphate  質(zhì)量規(guī)格:1M in H2O(260Mg/ml),進(jìn)口原裝
人體脂肪組織提取物SMAF人特異性巨噬細(xì)胞武裝因子規(guī)格:48T/96T 棉籽糖 HPLC98% 20mg

SmIg人細(xì)胞膜表面球蛋白規(guī)格:48T/96T 莫諾苯宗 HPLC98% 20mg

SOCS-3人細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子3規(guī)格:48T/96T 莫諾苷 HPLC97% 20mg

SS人生長(zhǎng)抑素規(guī)格:48T/96T 牡丹皮苷C HPLC98% 20mg

STK人絲氨酸/蘇氨酸蛋酸酶規(guī)格:48T/96T 牡荊內(nèi)酯 HPLC98% 20mg

ST人血清素/血清胺規(guī)格:48T/96T 牡荊素 HPLC98% 20mg

TAA人腫瘤相關(guān)抗原規(guī)格:48T/96T 牡荊素精銨酸鹽 HPLC98% 20mg

TACE人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶規(guī)格:48T/96T 牡荊素葡萄糖苷 HPLC98% 20mg

TACE人腫瘤壞死因子α轉(zhuǎn)化酶規(guī)格:48T/96T 牡荊素鼠李糖苷 HPLC98% 20mg

TAFI人纖溶抑制因子規(guī)格:48T/96T 牡荊油 HPLC98% 20mg
收到人體脂肪組織提取物如何處理?
1
、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2
、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3
、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4
、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5
、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6
、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作。

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公司名稱 上海谷研實(shí)業(yè)有限公司
聯(lián)系賣家 郭小姐 (QQ:3004905818)
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