準(zhǔn)備物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀釋液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

普通PCR反應(yīng)流程：

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板：一塊（96孔）

2、 標(biāo)準(zhǔn)品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

反應(yīng)五要素：

塞姆利基森林病毒PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3'端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)， 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn)， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好，引物濃度偏高會引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增，且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

使用方法 ：   

1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑

1.1 器材

1）PCR儀

2）PCR反應(yīng)管

3）電泳儀及水平電泳槽

4）高速離心機(jī)

5）微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1）瓊脂糖

2）EB（溴化乙錠）

3）去離子水或雙蒸水

注意事項(xiàng)：   

5.1使用本試劑前請仔細(xì)閱讀本說明書全文。

5.2 操作時(shí)應(yīng)盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個(gè)檢測過程中，反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行，以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時(shí)，試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻（混勻時(shí)禁止激烈振蕩，只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻）。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后，應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增，以免形成過多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測靈敏度，建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。

Mouse carcinoembryonic antign, CEA Elisa Kit 蘇木色精，蘇木素Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Mouse Cluster of differentiation 19, CD19 Elisa Kit核苷酸5’-一磷酸腺苷鈉鹽;AMP鈉鹽Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

Mouse Cluster of differentiation 19, CD19 Elisa KitCTP.Na2；胞苷-5’-三磷酸二鈉鹽Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Mouse Cluster of differentiation 3, CD3 Elisa Kit5-甲基尿苷Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

Mouse Cluster of differentiation 3, CD3 Elisa Kit2,2’-脫水尿苷；環(huán)尿苷Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3, AFP-L3 Elisa KitX-gal;5-溴-4氯-3吲哚基β-D半乳糖Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 3, AFP-L3 Elisa Kit熒光胺Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 2, AFP-L2 Elisa Kit4-氯-1-萘酚(4C1N)Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 2, AFP-L2 Elisa Kit親和素；卵白素來源于雞蛋白Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 1, AFP-L1 Elisa Kit鏈霉親和素Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

Mouse alpha-fetoprotein Lens culinaris agglutiin 1, AFP-L1 Elisa Kit西他沙星Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Mouse Methemoglobin, MHB Elisa Kit DHBS；3,5-二氯-2-羥基苯磺酸鈉Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

Mouse Methemoglobin, MHB Elisa Kit BGP；β-甘油磷酸鈉水合物(高純)Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Mouse CTX-2 Elisa KitFura 2-AM;鈣熒光探針Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T

Mouse CTX-2 Elisa KitNBD-F；4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并氧雜惡二唑Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：96T

Mouse C-telopeptide of type Ⅰ collagen, CTX-Ⅰ Elisa Kit魯米諾,發(fā)光氨Mouse/小鼠Elisa試劑盒規(guī)格：48T
塞姆利基森林病毒PCR檢測試劑盒CDCA4  細(xì)胞分裂周期相關(guān)蛋白4抗體 Mouse VEGF-C ELISA kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

CDC42  細(xì)胞分化周期CDC42蛋白抗體 Mouse IL-12(P40)ELISA KIT 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

Phospho-CDC42 (Ser71)  磷酸化細(xì)胞分化周期CDC42蛋白抗體 Mouse VEGF-D（h） ELISA kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

Cip4  細(xì)胞分化周期CDC42相互作用蛋白4抗體 Mouse IGFBP4 ELISA kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

BubR1  有絲分裂檢驗(yàn)點(diǎn)蛋白BubR1抗體 Mouse IGFBP1 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

CDK1/Cdc2  周期素依賴性激酶1抗體 Mouse HGF ELISA kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

CDK2  周期素依賴性激酶2抗體 Mouse  Vascuoar endothelial cell growth factor receptor 3(Flt-4)—ELISA kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

CLIP1/CLIP170  細(xì)胞質(zhì)連接蛋白1抗體 Mouse GH ELISA KIT 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝