208F大鼠成纖維細(xì)胞
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208F大鼠成纖維細(xì)胞

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上海博湖生物科技有限公司

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商品參數(shù)
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商品介紹
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是否進(jìn)口 是
貨號(hào) BH-C3020
用途類別 科研
產(chǎn)品規(guī)格 5×105cells/瓶
品牌 博湖
用途范圍 產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 208F大鼠成纖維細(xì)胞
商品介紹

公司細(xì)胞現(xiàn)貨供應(yīng)，質(zhì)量有保證、價(jià)格優(yōu)惠、實(shí)驗(yàn)效果好，我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù)，同時(shí)提供最新價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明。

產(chǎn)品名稱208F大鼠成纖維細(xì)胞
英文名稱：
208F rat fibroblasts
編號(hào)BH-C3020

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 


實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。


細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：

1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞

在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長(zhǎng)時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。

2.研究條件可以人為控制

pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。

3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性

通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。

4.研究?jī)?nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄

采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

IL36B重組人 IL36B / IL1F8 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL36A重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

FGFR2重組人 FGFR2 / CD332 蛋白 (aa 400-821, His & GST 標(biāo)簽) Protein

MS4A1重組人 CD20 / MS4A1 蛋白 (aa 213-297, His 標(biāo)簽) Protein

CXCL12重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白 (isoform a) Protein

CASP7重組人 CASP7 / caspase 7 / MCH3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

SHH重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 198-462, His 標(biāo)簽) Protein

HFE2重組人 Hemojuvelin / HFE2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

DEFB103A重組人 Defensin / Beta-defensin 3 / DEFB103 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

MFGE8重組人 MFG-E8 / lactadherin / MFGE8 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

GPR114重組人 GPR114 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

Morphine (C1F3) 嗎啡單克隆抗體

Morphine(2F11) 嗎啡單克隆抗體

MAS1 GTP結(jié)合蛋白MAS1抗體

MAG 髓鞘相關(guān)糖蛋白-a抗體

MAGE-1 黑色素瘤相關(guān)抗原抗體

Mkl1 myocardin相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體

MTF-1 金屬應(yīng)答元件結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子-1抗體

MAP3K8 絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體

Phospho-MAP3K8 (Ser400) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體

Phospho-MAP3K8 (Thr290) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶8抗體

MFSD2A 促進(jìn)調(diào)解蛋白家族2A抗體

MIA2 黑色素瘤抑制活性蛋白2抗體

MTSS1 腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1

MLCK 肌球蛋白輕鏈激酶抗體

MYCBPAP MYCBPAP抗體

MHC class I 組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體

MRPS22 線粒體核糖體蛋白S22抗體

MPP7 棕櫚酰化膜蛋白7抗體

Marijuana(2B1) 小鼠抗大麻單克隆抗體

MYL1+3 肌球蛋白輕鏈1/3抗體

phospho-MLC(Ser20) 磷酸化肌球蛋白輕鏈抗體

MuRF1/Trim63 肌肉細(xì)胞特異性泛素蛋白連接酶1抗體

MAFbx/Fbx32 泛素蛋白連接酶抗體

MCT2 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2抗體

MDH1 可溶性蘋果酸脫氫酶抗體

PKC delta 蛋白激酶C亞性D型抗體

Phospho-mu Opioid Receptor (Ser375) 磷酸化μ-型阿片受體抗體

Phospho-MEK1 + MEK2 (Ser222) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1/2抗體

MMP9 基質(zhì)金屬蛋白酶9抗體

MIS12 染色體及有絲分裂蛋白MIS12抗體

MCT1 單羧酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白-1抗體

Mitochondrial ribosomal protein L11 線粒體核糖體蛋白L11抗體

Myocardin 促血管平滑肌細(xì)胞分化因子抗體

MS4A2 跨膜結(jié)構(gòu)域4亞家族成員2抗體

phospho-C-Myc(Thr373) 磷酸化致癌基因C-Myc抗體

Myotilin 肌收縮蛋白MYOT抗體

phospho-MAP4K4(Ser631) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗體

RNF59 環(huán)指蛋白59抗體

phospho-MAP4K4(Ser629) 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MAP4K4抗體

MVK 甲羥戊酸激酶抗體

MVD 甲羥戊酸脫羧酶抗體

ME1 胞漿蘋果酸酶1抗體

MHC class I 組織相容性復(fù)合體蛋白1抗體

MFAP3L

208F大鼠成纖維細(xì)胞細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞收集，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，少量保存上清液（防止細(xì)胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，吹打均勻后，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO搖勻后進(jìn)行凍存。
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