技術原理:

DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。

在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復性，并設計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。（ DNA高溫變性低溫復性）

發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術得以大量應用，并逐步應用于臨床。

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

實驗注意事項：

1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；

2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；

3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設計的引物來指示擴增的增加。運用該技術可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

主要技術：引物設計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

PCR反應的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行，結合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應，一般在2～4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板。可直接用臨床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

無水鈉(農殘級)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：農殘級純度：>95%

無水鈉(for HPLC,≥99.0%(T))   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：for HPLC,≥99.0%(T)純度：>95%

碳鈉(for HPLC,≥99.0%)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：for HPLC,≥99.0%純度：>95%

四丁基碘化銨(離子對色譜級)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：離子對色譜級純度：>95%

三辛(離子對試劑)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：離子對試劑純度：>95%

草鈉容量分析用溶液標準物質(0.05M)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：0.05M純度：>95%

剛果紅(分析標準品,≥97.0%(HPLC))   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標準品,≥97.0%(HPLC)純度：>95%

正癸(分析標準品,≥99.5%(GC))   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標準品,≥99.5%(GC)純度：>95%

基反亞油(分析標準品)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標準品純度：>95%

肉豆蔻(分析標準品,≥99.5%(GC))   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標準品,≥99.5%(GC)純度：>95%

棕櫚(分析標準品,≥99.0%(GC))   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標準品,≥99.0%(GC)純度：>95%

亞麻(標準品)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標準品純度：>95%

十一(標準品)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標準品純度：>95%

十九(標準品)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標準品純度：>95%

丙二(標準品)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標準品純度：>95%

D異抗壞血(標準品)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：分析標準品純度：>95%

phosphoBACH1/BRIP1(Ser990)  化癌易感基因相互作用蛋白1一抗    特價促銷 0.1ml Pentabromophenyl ether

Adenylate Kinase 1/AK1  腺苷激酶1一抗    特價促銷 0.2ml 3Amino3azabicyclo[3.3.0]octane hydrochloride

CTNNBIP1  β鏈接素相互作用蛋白1一抗    特價促銷 0.1ml Kasugamycin

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phosphoCTNNBIP1 (Thr43/Ser50)  化β鏈接素相互作用蛋白1一抗    特價促銷 0.1ml Tulathromycin A

AKR1D1  醛固還原酶家族1成員D1一抗    特價促銷 0.2ml Latamoxef sodium

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棉酚 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111517200001 Diethyl succinate

木犀草素 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111520200504 Diethyl sebacate

金絲桃苷 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111521200303 Docosane

升麻素苷 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111522200406 Dotriacontane

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木香烴內酯 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111524200503 4Hydroxybutanoic acid lactone

去氫木香內酯 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111525200404 γHeptalactone

蒙花苷 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111528200504 (+)Fenchone

五味子酯 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111529200302 Indole

毛蕊花糖苷（麥角甾苷） 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111530200505 Ethyl octanoate

毛兩面針素 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111531200001 2Ethyl1hexanol

巖白菜素 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111532200202 Ethyl palmitate

高三尖杉酯堿 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111533200403 2Ethylhexanoic acid

紫杉醇 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111534200202 pAnisaldehyde

白藜蘆醇 進口/國產(chǎn)  規(guī)格: 111535200502 Bis(2ethylhexyl)adipate