技術(shù)原理:

DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下，根據(jù)堿基互補(bǔ)配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。

在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）

發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個(gè)循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時(shí)也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進(jìn)行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：

1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實(shí)驗(yàn)前請充分溝通確認(rèn)實(shí)驗(yàn)方案和樣本情況；

2）客戶盡可能提供實(shí)驗(yàn)的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；

3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

實(shí)時(shí)熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán)，利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實(shí)時(shí)熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計(jì)的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

主要技術(shù)：引物設(shè)計(jì)、RNA提取、cDNA合成、qPCR

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

丙酮中六氯苯溶液標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 1mL Anaplasma marginale邊緣無漿體(無形體)染料法熒光定量PCR試劑盒

規(guī)格： 0.1ml請?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

HDAC4  組蛋白去乙酰化酶4抗體規(guī)格： 0.2ml請?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

HDAC5  組蛋白去乙?；?抗體規(guī)格： 0.2ml請?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

HDAC6  組蛋白去乙酰化酶6抗體規(guī)格： 0.2ml請?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系"

"PDCD1 Others Mouse 小鼠 PD1 / PDCD1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 請?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

人肺動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞RNAHPASMC miRNA5 μg請?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

MTDH Others Human 人 MTDH / lyric / metadherin 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 請?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

U251細(xì)胞，細(xì)胞 鼠成纖維細(xì)胞系,NIH/3T3細(xì)胞 人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株;PG-LH7請?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

KM小鼠未分化神經(jīng)瘤株;B22請?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

豬細(xì)胞;ST請?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

BMP3  骨形態(tài)發(fā)生蛋白3抗體規(guī)格： 0.1ml請?jiān)儍r(jià)1 x 10^6 cells/T25培養(yǎng)瓶細(xì)胞系

BMP4  骨形態(tài)發(fā)生蛋白4抗體規(guī)格： 0.2ml

L-精氨酸純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 100mg Ancylostoma duodenale十二指腸鉤口線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒

L-異亮氨酸純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 100mg Anisakis spp.異尖線蟲屬PCR試劑盒

L-亮氨酸純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 100mg Anisakis spp.異尖線蟲屬染料法熒光定量PCR試劑盒

L-纈氨酸純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 100mg Anisakis spp.異尖線蟲屬探針法熒光定量PCR試劑盒

L-苯丙氨酸純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì) 100mg Aphanomyces astaci變形絲囊霉菌PCR試劑盒
梅花LAMP鑒定試劑盒價(jià)格氯吡苯脲/氯吡脲/調(diào)吡脲/吡效隆醇/吡效隆/KT-30/CPPU/4PU-30/CN-11-3183試劑級，98%5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，68157-60-8RT

25克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，

100克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，

中文名稱： 氯吡苯脲

其他名稱： 氯吡脲；調(diào)吡脲；吡效隆醇；吡效隆

英文名稱： KT-30

其他名稱： CPPU；4PU-30；CN-11-3183；Forchlorfenuron；Fulmet

產(chǎn)品規(guī)格： 試劑級，98%

包 裝： 1克/5克/25克/100克

CAS號：68157-60-8

C12H10ClN3O=247.68

級別：Reagent grade

含量：≥98.0%

干燥失重：≤0.5%

灼燒殘?jiān)?/span>≤0.1%

熔點(diǎn)：171～173℃

性狀：結(jié)晶粉末。屬細(xì)胞分裂素類生長調(diào)節(jié)劑。有分裂和擴(kuò)大，器官形成和蛋白質(zhì)的合成，提高光合作用效率，增強(qiáng)抗逆性，，提高座果率，促進(jìn)果實(shí)膨大等作用。 適應(yīng)范圍：果樹及瓜果類植物

用途：生化研究。是一種具有細(xì)胞分裂素活性的苯脲類植物生長調(diào)節(jié)劑，其生物活性卻較6-芐氨基嘌呤高10-100倍。廣泛用于農(nóng)業(yè)，園藝和果樹，分裂，擴(kuò)大伸長，促進(jìn)果實(shí)肥大；提高產(chǎn)量； 保鮮等

保存：2～8℃