樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。

仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無(wú)菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
產(chǎn)品名稱(chēng)：小鼠大內(nèi)皮素(BigET)ELISA檢測(cè)試劑盒

英文名稱(chēng)：BigET

規(guī)格：96T/48T

特點(diǎn)：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好

用途:科研實(shí)驗(yàn)等領(lǐng)域科學(xué)研究，產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷

運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)

試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚(yú)、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cāng)鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動(dòng)植物。

待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

實(shí)驗(yàn)步驟:

石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 

1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 

2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次

10 min； 

3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無(wú)水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%

乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 

4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說(shuō)明書(shū)推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫

度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來(lái)水沖洗，ddH2O 洗 2×

2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見(jiàn)附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，

直接進(jìn)入第 5 步封閉。 

5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 

6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過(guò)夜； 

7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 

9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育

30 min； 

10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 

12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37

℃濕盒中孵育 30 min； 

13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 

14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 

15.復(fù)染：自來(lái)水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明； 

16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 

17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。

需自備試劑和器材：

1． 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

2． 自動(dòng)洗板機(jī)。

3.  37℃恒溫箱。

4． 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測(cè)樣品較多時(shí)用多通道移液器。

5． 干凈的試管和 Eppendof 管。

6． 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS   配法為：1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。

0.01 M PBS（pH7.2-7.6）  配法：1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽，應(yīng)加上分子式中水的含量。

9.  蒸餾水

10. 吸水紙  

磷酸化上皮鈣粘附分子抗體HUS1B ELISA KitAlias: HUS1BELISAKitReactivity: HumanRange: Required

BRD2蛋白抗體HSPB2 ELISA KitAlias: HSPB2ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

BRD3蛋白抗體HSPA1L ELISA KitAlias: HSPA1LELISAKitReactivity: HumanRange: Required

磷酸化酪氨酸蛋白激酶6/乳腺腫瘤激酶抗體HSPB7 ELISA KitAlias: HSPB7ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

磷酸化蛋白酪氨酸激酶ATK抗體HUS1B ELISA KitAlias: HUS1BELISAKitReactivity: HumanRange: Required

磷酸化EGF應(yīng)答因子1抗體HSPA1L ELISA KitAlias: HSPA1LELISAKitReactivity: HumanRange: Required

乳腺癌易感基因相互作用蛋白1抗體HSPB2 ELISA KitAlias: HSPB2ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

磷酸化乳腺癌易感基因相互作用蛋白1抗體HSPB7 ELISA KitAlias: HSPB7ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

雙向染色體細(xì)胞分裂蛋白1抗體HSD17B6 ELISA KitAlias: HSD17B6ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

細(xì)胞骨架銜接蛋白BIN3抗體HSD17B7 ELISA KitAlias: HSD17B7ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

Bcr抗體HSD17B8 ELISA KitAlias: HSD17B8ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

磷酸化乳腺癌易感基因1抗體(人)HSD3B2 ELISA KitAlias: HSD3B2ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

磷酸化T淋巴細(xì)胞受體抗體HPS6 ELISA KitAlias: HPS6ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

B淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體HPSE2 ELISA KitAlias: HPSE2ELISAKitReactivity: HumanRange: Required

磷酸化T淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體HRASLS5 ELISA KitAlias: HRASLS5ELISAKitReactivity: HumanRange: Required
小鼠大內(nèi)皮素(BigET)ELISA檢測(cè)試劑盒沙紙寧CPhenol,2-[3-(3-hydroxy-4-methoxyphenyl)- propyl]-5-methoxy- 對(duì)照藥材CAS NO.: 90902-21-9 分 子 式: C17H20O4 分 子 量: 288.3383熔點(diǎn):  72-74儲(chǔ)存條件:  2-8℃來(lái)源:  Constit. of Broussonetia papyrifera溶解性:  溶于甲醇，氯仿，微溶于水，正己烷

喇叭茶醇Palustrol (Ledum)化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品CAS NO.: 5986-49-2 分 子 式: C15H26O 分 子 量: 222.36634儲(chǔ)存條件:  2-8℃外觀:  Powder

鹽酸甜菜堿Betaine hydrochloride中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.: 590-46-5 分 子 式: C5H12ClNO2 分 子 量: 153.6

蝙蝠葛蘇林堿daurisoline中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.: 70553-76-3 分 子 式: C37H42N2O6 分 子 量: 610.73918熔點(diǎn):  96-102比旋光度:  (c, 0.65 in MeOH)-129儲(chǔ)存條件:  2-8℃檢測(cè)方法:  HPLC≥98%

Tris-Maleate緩沖液(1mol/L，pH5.0-8.5)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液CAS NO.:  分 子 式:  分 子 量:

Alpha-生育三烯酚2H-1-Benzopyran-6-ol,3,4-dihydro-2,5,7,8-tetramethyl-2-(4,8,12-trimethyl-3,7,11-tridecatrien-1-yl)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品CAS NO.: 1721-51-3 分 子 式: C29H44O2 分 子 量: 424.65846儲(chǔ)存條件:  2-8℃外觀:  Powder

3-表卡通酸Olean-12-en-29-oicacid, 3-hydroxy-, (3b,20a)-對(duì)照藥材CAS NO.: 76035-62-6 分 子 式: C30H48O3 分 子 量: 熔點(diǎn): 283-284比旋光度: 61儲(chǔ)存條件: 2-8℃檢測(cè)方法: HPLC≥98%

利血那明Yohimban-16-carboxylicacid,11,17-dimethoxy-18-[[(2E)-1-oxo-3-(3,4,5-trimethoxyphenyl)-2-propen-1-yl]oxy]-,methyl ester, (3b,16b,17a,18b,20a)-化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品CAS NO.: 24815-24-5 分 子 式: C35H42N2O9 分 子 量: 儲(chǔ)存條件:  2-8℃外觀:  Powder