庫(kù)皮科斯病毒PCR檢測(cè)試劑盒
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商品參數(shù)
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商品介紹
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用途范圍 僅用于科研
純度 98%%
產(chǎn)地 進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)
品牌 上海一研
規(guī)格 50T
貨號(hào) EY00P347
是否進(jìn)口
商品介紹

反應(yīng)五要素:
庫(kù)皮科斯病毒PCR檢測(cè)試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn), 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點(diǎn), 這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會(huì)引起錯(cuò)配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會(huì)。

準(zhǔn)備物品:

清理液(A)                                   毫升

染色液(t B)                                   微升

稀釋液(C)                                   毫升

溶解液(tD)                                   毫升

產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)                                   1份

            產(chǎn)品名稱(chēng)

               英文名稱(chēng)

                規(guī)格

庫(kù)皮科斯病毒PCR檢測(cè)試劑盒

Cupixi virus(CPXV)RTPCR

                  50T

普通PCR反應(yīng)流程:

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋?zhuān)ㄗⅲ翰灰苯釉诎逯羞M(jìn)行倍比稀釋?zhuān)?,分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類(lèi)推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。

使用方法    

1 實(shí)驗(yàn)所需器材與試劑

1.1 器材

1)PCR儀

2)PCR反應(yīng)管

3)電泳儀及水平電泳槽

4)高速離心機(jī)

5)微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1)瓊脂糖

2)EB(溴化乙錠)

3)去離子水或雙蒸水

注意事項(xiàng):   

5.1使用本試劑前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說(shuō)明書(shū)全文。

5.2 操作時(shí)應(yīng)盡量少說(shuō)話(huà),因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽(yáng)性;整個(gè)檢測(cè)過(guò)程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。 5.3 實(shí)驗(yàn)時(shí),試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時(shí)禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過(guò)多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會(huì)影響本品的檢測(cè)結(jié)果。如果用戶(hù)需要進(jìn)一步提高檢測(cè)靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測(cè)。

氯倍他索相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: Human Cholecystokinin ELISA Kit

匹伐氯可托龍標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 34097-16-0Human cholesterolestertransferprotein ELISA Kit

吩嗪標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 2030-63-9Human Monocyte chemotactic protein-3,MCP-3 ELISA kit

氯貝丁酯標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 637-07-0Human Monocyte chemotactic protein-2,MCP-2 ELISA kit

枸櫞酸氯米芬標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 50-41-9Human Monocyte chemotactic protein-1,MCP-1 ELISA kit

氯米芬相關(guān)雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 74056-26-1Human BigET ELISA Kit

氯丙咪嗪標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 17321-77-6human PRL ELISA KIT

標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 16human GnRH ELISA KIT

相關(guān)雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 55198-89-5Human GRH ELISA Kit

相關(guān)雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 2011-66-7human ACTH ELISA KIT

相關(guān)雜質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 52130-87-7Human ATH ELISA Kit

可樂(lè)定標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 4205-90-7human CRH ELISA KIT

可樂(lè)定標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 4205-91-8Human Prolactin ELISA Kit

可樂(lè)定相關(guān)雜質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 54707-71-0human FSH ELISA KIT

可樂(lè)定雜質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: human FSH ELISA KIT

氯革酸鉀標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷(xiāo)  規(guī)格: 57109-90-7Human thyrotropin-releasing hormone ELISA Kit
庫(kù)皮科斯病毒PCR檢測(cè)試劑盒大鼠游離前列腺特異性抗原(fPSA)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Prednisolone Hemisnate 5mg

大鼠游離甲狀腺素(FT4)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Prednisolone Acetate 1g

大鼠游離睪酮(F-TESTO)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Prednisolone 100mg

大鼠游離β絨毛膜促性腺激素(f-βCG)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Prednicarbate 1g

大鼠幽門(mén)螺旋菌IgG(Hp-IgG)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Prazosin Hydrochloride 10mg

大鼠抑制素結(jié)合蛋白(INHBP)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Praziquantel 100mg

大鼠抑制素B(INH-B)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Prazepam CIV 1g

大鼠抑制素A(INH-A)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Pravastatin Sodium 50mg

 


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