愛德華氏菌通用PCR檢測試劑盒
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上海一研生物科技有限公司

店齡6年 企業(yè)認(rèn)證

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商品參數(shù)
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商品介紹
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用途范圍 僅用于科研
純度 98%%
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 上海一研
規(guī)格 50T
貨號 EY00P393
是否進(jìn)口
商品介紹

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

            產(chǎn)品名稱

               英文名稱

                規(guī)格

愛德華氏菌通用PCR檢測試劑盒

Edwardsiella spp.PCR

                  50T

普通PCR反應(yīng)流程:

 

準(zhǔn)備物品:

清理液(A)                                   毫升

染色液(t B)                                   微升

稀釋液(C)                                   毫升

溶解液(tD)                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

使用方法    

1 實驗所需器材與試劑

1.1 器材

1)PCR儀

2)PCR反應(yīng)管

3)電泳儀及水平電泳槽

4)高速離心機(jī)

5)微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1)瓊脂糖

2)EB(溴化乙錠)

3)去離子水或雙蒸水

注意事項:   

愛德華氏菌通用PCR檢測試劑盒5.1使用本試劑前請仔細(xì)閱讀本說明書全文。

5.2 操作時應(yīng)盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。 5.3 實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。

酮康唑標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 65277-42-1 Powdered Cat’s Claw Extract

酮洛芬相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 68432-95-1 Powdered Black Cohosh Extract

酮洛芬相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 66067-44-5 Powdered Bilberry Extract

酮洛芬標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 22071-15-4 Powdered Asian Ginseng Extract

酮洛芬相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 107257-20-5 Powdered Ashwagandha Extract

鹽拉貝洛爾標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 32780-64-6 Powdered Andrographis Extract

酮咯氨丁三醇標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 74103-07-4 Povidone

無水乳糖標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 63-42-3 Potassium Sucrose Octasulfate

乳糖醇標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 81025-04-9 Potassium Sorbate (AS)

B-D-半乳糖苷酶標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 2604851Potassium Iodide (AS)

乳糖一水標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 5989-81-1 Potassium Guaiacolsulfonate

乳標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 50-21-5 Potassium Gluconate

拉莫三嗪標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 84057-84-1 Potassium Citrate (AS)

拉莫三嗪相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 50-45-3 Potassium Chloride (AS)

拉莫三嗪相關(guān)物質(zhì)C標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: Potassium Carbonate (AS)

拉莫三嗪相關(guān)物質(zhì)D標(biāo)準(zhǔn)品 現(xiàn)貨促銷  規(guī)格: 252186-79-1 Potassium Bitartrate (AS)
大鼠活化蛋白C(APC)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Methenamine 1g

大鼠黃體生成素釋放激素(LHRH)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Methdilazine Hydrochloride 25ML

大鼠環(huán)磷腺苷(cAMP)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Methazolamide 50mg

大鼠環(huán)磷鳥苷(cGMP)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Metharbital CIII 10mg

大鼠環(huán)孢素A(CsA)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Methapyrilene Fumarate 250mg

大鼠紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Methantheline Bromide 100mg

大鼠紅細(xì)胞生成素(EPO)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) Methacycline Hydrochloride 1g

大鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α )Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Methacholine Chloride (AS) 5mg
反應(yīng)五要素:

愛德華氏菌通用PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

 


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