液相色譜檢測生物藥中蛋白質(zhì)雜質(zhì)殘留

目前臨床上已經(jīng)規(guī)模應用生物技術藥物，為制藥工業(yè)帶來了變革和機遇，但在其生產(chǎn)過程中涉及細菌的培養(yǎng)、蛋白質(zhì)的分離純化等，過程中非常容易引入生產(chǎn)用細菌中的其他蛋白質(zhì)，或在貯存環(huán)境摻雜相關雜質(zhì)，如前體、異構體及某些降解產(chǎn)物等，具有高度的不均一性和不確定性。蛋白質(zhì)類雜質(zhì)是一個普遍且相對復雜的生產(chǎn)問題，在生產(chǎn)過程中分辨所有蛋白雜質(zhì)難度非常大，但為增加產(chǎn)品安全性，對雜蛋白進行分析和控制的重要性不言而喻。

分析蛋白雜質(zhì)主要技術包含：高效液相色譜和免疫學分析（ELISA和West‐ernblot）凝膠電泳、二維電泳及質(zhì)譜技術、毛細管電泳等，高效液相色譜法要求樣品能制成溶液，而不需要氣化，可直接用于分析難揮發(fā)、熱不穩(wěn)定及高分子樣品，擴大了色譜法的應用范圍。

微源檢測查閱資料利用茵梔黃注射ye為藥物模型根據(jù)檢測波長，采用紫外末端吸收的高效凝膠排阻色譜法對注射劑中的大分子蛋白進行了檢測。

色譜條件：

精確量取2ml茵梔黃注射劑，用0.45μm微孔濾膜過濾后直接作為樣品溶液,

對照品溶液稱取牛血清白蛋白5.0mg，置于容量瓶中加流動相溶解，稀釋制備成1000μg/mL的儲備液。分別精密量取適量的儲備液，加入流動相進行稀釋，混勻，得到濃度為40.0，20.0，10.0，5.00，2.50，1.25，0.625，0.312μg/mL的對照品溶液；

加標樣品溶液的制備：稱取牛血清白蛋白3.80mg于量瓶中，加茵梔黃注射yr，溶解稀釋至刻度，制備成380μg/mL的儲備液，量取適量的儲備液，加入茵梔黃注射ye進行稀釋混合得到，濃度為38.0，3.80，0.380μg/mL的樣品加標溶液。

取對照品溶液、樣品溶液及加標樣品溶液色譜條件進樣分析，記錄色譜圖

210nm波長（a）、220nm波長（b）處牛血清白蛋白（40.0μg/mL）色譜圖

目前國內(nèi)在已上市的來源于微生物、植物或動物組織的蛋白質(zhì)藥物中，很多品種未對其生產(chǎn)過程引入或產(chǎn)品本身含有的相關雜蛋白進行研究，產(chǎn)品質(zhì)量控制上缺少方法。本文通過茵梔黃注射劑舉例為其他同類藥物中的蛋白雜質(zhì)的檢測提供了一種可借鑒的檢測方法。

公司介紹：

       微源檢測，是集研發(fā)分析測試服務、藥物質(zhì)量研究、基因毒雜質(zhì)研究、元素雜質(zhì)研究、結構確認、生物藥分析服務等一體，面向全球的獨立第三方生物醫(yī)藥研發(fā)測試服務公司。

由國內(nèi)領先的科學服務企業(yè)上海泰坦科技股份有限公司（簡稱：泰坦科技）參股成立，秉承“讓檢測精準又高效”的價值觀：

l資質(zhì)實驗室 CMA,CNAS，按照ISO-17025和GMP要求建立的實驗室

l建設有1500+平米的高標準生物醫(yī)藥實驗室

l專業(yè)技術研發(fā)團隊成員經(jīng)驗豐富，3天出具檢測結果

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l已服務100+生物制藥企業(yè)

l現(xiàn)已成功完成2189個項目

l前期溝通、寄送樣品、檢測分析、出具報告全程一對一服務 

       微源檢測定制的個性化方案，為客戶提供了專業(yè)可靠，高效率、高質(zhì)量、合規(guī)的檢測分析服務。協(xié)助客戶解決了檢測,分析,測試等各類問題，縮短了工藝驗證或方法建立所用的時間，降低研發(fā)風險，縮短研發(fā)周期，推進產(chǎn)品的市場化進程。