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微源檢測(cè)離子色譜-脈沖安培法測(cè)定三羥甲基氨基甲烷(Tris)含量
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離子色譜-脈沖安培法測(cè)定三羥甲基氨基甲烷(Tris)含量
三羥甲基氨基甲烷(Tris),又名氨基丁三醇,生產(chǎn)過程中常用于調(diào)節(jié)酸堿平衡,生物化學(xué)和分子生物實(shí)驗(yàn)中緩沖液的制備,醫(yī)藥中間體等,目前檢測(cè)Tris的主要方法有分光光度法、高效液相色譜法、離子色譜-電導(dǎo)檢測(cè)器法等。
但一些藥物產(chǎn)品中含有蛋白質(zhì)甘氨酸鈉離子等輔料的情況下,測(cè)定Tris使用上述方法就會(huì)有干擾因素操作復(fù)雜等問題出現(xiàn)。微源檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室利用實(shí)驗(yàn)室條件,查閱文獻(xiàn)資料試驗(yàn)了離子色譜-脈沖安培測(cè)定法并驗(yàn)證了方法的專屬性、線性、及準(zhǔn)確性。
精密稱取三羥甲基氨基甲烷(Tris)100mg置于容量瓶中,用蒸餾水溶解混勻后定容,將三羥甲基氨基甲烷(Tris)溶液濃度調(diào)整至10mmol/L。再精密吸取100、200、400、600、800μL分別置于100mL容量瓶中,用蒸餾水溶解混勻后定容,配制成0.01、0.02、0.04、0.06、0.08mmol/L的三羥甲基氨基甲烷(Tris)對(duì)照品溶液。
這里的供試品以凍干人凝血mei,(Thrombin)為例。供試品Thrombin溶液按照標(biāo)示注射用水復(fù)溶。供試品人凝血因子Ⅷ溶液按照標(biāo)示注射用水復(fù)溶,此溶液含約的甘氨酸、鈉離子、蛋白質(zhì)及其他物質(zhì)。
色譜柱 | IonpacCS16(5mm×250mm) |
淋洗液 | 40mmol/LMSA,流速;1.0mL/min |
500mmol/L氫氧化鈉;流速:0.3mL/min | |
柱溫 | 30℃ |
專屬性:取0.01mmol/L的三羥甲基氨基甲烷(Tris)對(duì)照品溶液、供試品人凝血因子Ⅷ溶液(經(jīng)稀釋)及供試品Thrombin溶液(經(jīng)稀釋),按照表格色譜條件進(jìn)樣檢測(cè),色譜圖如下所示:
線性范圍:取0.01、0.02、0.04、0.06、0.08mmol/L的三羥甲基氨基甲烷(Tris)對(duì)照品溶液,以Tris對(duì)照品濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo),表格所示色譜條件分別進(jìn)樣測(cè)定檢測(cè)結(jié)果表明,Tris的保留時(shí)間為6.0min,相關(guān)系數(shù)(R2)>0.99。
利用離子色譜-脈沖安培法進(jìn)行的專屬性、線性驗(yàn)證,得出結(jié)論為該方法檢測(cè)三羥甲基氨基甲烷含量,供試品中甘氨酸、鈉離子等物質(zhì)對(duì)Tris的測(cè)定沒有過程干擾,專屬性好,呈現(xiàn)出良好的線性關(guān)系,可用做三羥甲基氨基甲烷(Tris)含量測(cè)定的方法。
公司介紹:
微源檢測(cè),是集研發(fā)分析測(cè)試服務(wù)、藥物質(zhì)量研究、基因毒雜質(zhì)研究、元素雜質(zhì)研究、結(jié)構(gòu)確認(rèn)、生物藥分析服務(wù)等一體,面向全球的獨(dú)立第三方生物醫(yī)藥研發(fā)測(cè)試服務(wù)公司。
由國(guó)內(nèi)領(lǐng)先的科學(xué)服務(wù)企業(yè)上海泰坦科技股份有限公司(簡(jiǎn)稱:泰坦科技)參股成立,秉承“讓檢測(cè)精準(zhǔn)又高效”的價(jià)值觀:
l資質(zhì)實(shí)驗(yàn)室 CMA,CNAS,按照ISO-17025和GMP要求建立的實(shí)驗(yàn)室
l建設(shè)有1500+平米的高標(biāo)準(zhǔn)生物醫(yī)藥實(shí)驗(yàn)室
l專業(yè)技術(shù)研發(fā)團(tuán)隊(duì)成員經(jīng)驗(yàn)豐富,3天出具檢測(cè)結(jié)果
l現(xiàn)有精密分析儀器100+臺(tái),均安裝網(wǎng)絡(luò)版審計(jì)追蹤軟件
l已服務(wù)100+生物制藥企業(yè)
l現(xiàn)已成功完成2189個(gè)項(xiàng)目
l前期溝通、寄送樣品、檢測(cè)分析、出具報(bào)告全程一對(duì)一服務(wù)
微源檢測(cè)定制的個(gè)性化方案,為客戶提供了專業(yè)可靠,高效率、高質(zhì)量、合規(guī)的檢測(cè)分析服務(wù)。協(xié)助客戶解決了檢測(cè),分析,測(cè)試等各類問題,縮短了工藝驗(yàn)證或方法建立所用的時(shí)間,降低研發(fā)風(fēng)險(xiǎn),縮短研發(fā)周期,推進(jìn)產(chǎn)品的市場(chǎng)化進(jìn)程。
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